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MDBK (NBL-1)
ティッシュ
腎臓
同義語
MDBK (NBL-1), NBL-1, Madin-Darby Bovine Kidney, Madin Darby Bovine Kidney

MDBK (NBL-1)

Cell line · 製品番号 600396

MDBK cells, short for Madin-Darby Bovine Kidney cells (also known as NBL-1), are an exceptional biological resource derived from the kidneys of apparently...

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01概要

説明

MDBK細胞はMadin-Darby Bovine Kidney細胞(NBL-1としても知られる)の略で、見かけ上健康な成人Bos taurus、特に雄個体の腎臓に由来する特別な生物学的資源である。これらの細胞は接着性に増殖し、上皮様形態を有している。

MDBK細胞の顕著な用途のひとつは、宿主細胞表面膜上のEimeria bovis由来抗原の発現に関するin vitro研究を促進する能力にある。
さらに、MDBK細胞は、シミアンウイルス5型やヒトパラインフルエンザウイルス2型などのパラミクソウイルスのVタンパク質による、シグナル転写因子活性化因子1および2(STAT1およびSTAT2)のユビキチン化と分解を中心とした研究にも使用されている。

平均倍加時間は24時間から35時間で、MDBK細胞は中程度の増殖率を示す。MDBK細胞株の樹立は、1957年2月18日、S.H.マディンとN.B.ダービーが健康な成牛の腎臓からの樹立に成功した時にさかのぼる。それ以来、この細胞は生物学研究の礎石となり、様々な科学分野で数々の画期的な進歩をもたらした。

MDBK細胞の核型分析によると、染色体数は51で、低二倍体であることがわかる。細胞集団内では、低倍数体状態は幹細胞染色体数2n=60として現れ、細胞の約5%に2S成分が存在する。さらに、11-14本のマーカー染色体が典型的に存在し、メタセントリック、サブメタセントリック、アクロテロセントリックの組み合わせからなる。特にx染色体は単染色体であり、HSR染色体やDM染色体は観察されない。

MDBK細胞は、生物学研究の領域で様々な応用が可能である。その有用性は3次元細胞培養にまで及び、科学者は複雑な組織様構造を再現して高度な研究を行うことができる。さらに、MDBK細胞はハイスループット・スクリーニングにおいて非常に貴重であり、様々な目的の化合物や薬剤の迅速かつ効率的なスクリーニングを促進する。さらに、これらの細胞は毒物学研究において重要な役割を果たしており、物質の安全性や生体への潜在的な悪影響を評価するために不可欠である。
ウイルス感受性に関しては、MDBK細胞は、オルセー小水疱性口内炎(インディアナ)ウイルス、伝染性ウシ鼻気管炎ウイルス、ウシ鼻気管炎ウイルス、ウシパルボウイルス、ウシアデノウイルス2および3、ウシウイルス下痢症ウイルス1、パラインフルエンザ3ウイルスを含むいくつかの病原体に対する感受性を示す。このように多様なウイルスに感受性があることから、MDBK細胞はウイルスの病原性を研究し、抗ウイルス戦略を評価する上で貴重な存在となっている。

ティッシュ
腎臓
同義語
  • MDBK (NBL-1)
  • NBL-1
  • Madin-Darby Bovine Kidney
  • Madin Darby Bovine Kidney

02分類

生物
ウシ
セックス
男性
成長特性
アドヘレント
バイオセーフティレベル
1

03特徴

形態学
上皮様

04識別子

引用
MDBK (NBL-1) (Cytion カタログ番号 600396)
NCBI 納税者番号
9913
セロサウルス
CVCL_0421

05発現と感受性

ウイルス
この系統は検査され、牛下痢ウイルス(BVD)がないことが示された。
ウイルス感受性
この細胞は、牛下痢ウイルス、水疱性口内炎(インディアナ株)、伝染性牛鼻気管炎ウイルス、牛パルボウイルス、牛アデノウイルスIおよびIII、パラインフルエンザウイルス3に感受性がある。
ウイルス耐性
ポリオウイルス2
逆転写酵素
ネガティブ
製品
ケラチン

06取り扱いと飼育

培地
EMEM(MEM Eagle)、w:2 mM L-グルタミン、w:2.2 g/L NaHCO3、w:EBSS(Cytion論文番号820100a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBSと1% NEAAを添加する。
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
接着した細胞から古いメデュームを取り除き、カルシウムとマグネシウ ムを除いたPBSで洗浄する。T25フラスコでは3-5ml、T75フラスコでは5-10mlのPBSを使用する。次に、T25フラスコでは1-2ml、T75フラスコでは2.5mlのアキュターゼで細胞を完全に覆う。室温で8-10分間インキュベートし、細胞を剥離させる。インキュベーション後、細胞を10mlの培地と静かに混合して再懸濁し、300xgで3分間遠心する。上清を捨て、細胞を新しいメデュームに懸濁し、新しいメデュームの入った新しいフラスコに移す。
播種密度
1 × 10⁴ 細胞/cm²
流体の更新
3日ごと
解凍後の回復
速い
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

08寄付者

品種/亜種
ボス・タウルス
ドナーの年齢
アダルト