Prejsť na obsah
MDBK (NBL-1)
Tkanivo
Obličky
Synonymá
MDBK (NBL-1), NBL-1, Madin-Darby Bovine Kidney, Madin Darby Bovine Kidney

Dokumenty

MDBK (NBL-1)

Cell line · Číslo výrobku 600396

MDBK cells, short for Madin-Darby Bovine Kidney cells (also known as NBL-1), are an exceptional biological resource derived from the kidneys of apparently...

€430.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunky MDBK, skratka pre Madin-Darby Bovine Kidney cells (známe aj ako NBL-1), sú výnimočným biologickým zdrojom získaným z obličiek zjavne zdravých dospelých jedincov Bos taurus, konkrétne samcov. Tieto bunky rastú adherentne a majú morfológiu podobnú epitelu.

Jedno z pozoruhodných využití buniek MDBK spočíva v ich schopnosti uľahčiť in vitro štúdie expresie antigénov pochádzajúcich z Eimeria bovis na povrchovej membráne hostiteľských buniek.
Okrem toho sa bunky MDBK použili pri výskumoch zameraných na ubikvitináciu a degradáciu signálnych transduktorov a aktivátorov transkripcie 1 a 2 (STAT1 a STAT2) proteínmi V paramyxovírusov, ako je napríklad simian virus five a ľudský vírus parainfluenzy typu 2.

Bunky MDBK s priemerným časom zdvojenia od 24 do 35 hodín vykazujú miernu mieru proliferácie. Vznik bunkovej línie MDBK sa datuje od 18. februára 1957, keď ju S. H. Madin a N. B. Darby úspešne získali z obličky zdravého dospelého vola. Odvtedy sa tieto bunky stali základom biologického výskumu a umožnili mnohé prelomové objavy v rôznych vedeckých oblastiach.

Analýza karyotypu buniek MDBK odhaľuje modálne číslo chromozómov 51, čo naznačuje hypodiploidný stav. V rámci bunkovej populácie sa hypodiploidný stav prejavuje ako kmeňový počet chromozómov 2n = 60, pričom zložka 2S sa vyskytuje približne v 5 % buniek. Okrem toho je zvyčajne prítomných 11 - 14 markerových chromozómov, ktoré tvoria kombináciu metacentrických, submetacentrických a akro-telocentrických chromozómov. Pozoruhodné je, že chromozóm x sa javí ako monozomický, pričom sa nepozorujú žiadne HSR chromozómy ani DM (dvojité minúty).

Bunky MDBK vykazujú celý rad aplikácií v oblasti biologického výskumu. Ich využiteľnosť sa rozširuje na 3D bunkové kultúry, ktoré umožňujú vedcom vytvárať komplexné štruktúry podobné tkanivám na pokročilé štúdie. Okrem toho sú bunky MDBK neoceniteľné pri vysoko výkonnom skríningu, ktorý uľahčuje rýchly a účinný skríning zlúčenín alebo látok na rôzne účely. Okrem toho tieto bunky zohrávajú kľúčovú úlohu v toxikologických štúdiách, ktoré sú nevyhnutné na hodnotenie bezpečnosti a potenciálnych nepriaznivých účinkov látok na živé organizmy.
Pokiaľ ide o citlivosť na vírusy, bunky MDBK vykazujú vnímavosť na niekoľko patogénov vrátane vírusu vezikulárnej stomatitídy Orsay (Indiana), vírusu infekčnej bovinnej rinotracheitídy, vírusu bovinnej rinotracheitídy, bovinného parvovírusu, bovinného adenovírusu 2 a 3, vírusu bovinnej vírusovej hnačky 1 a vírusu parainfluenzy 3. Vďaka tejto citlivosti na rôznorodé vírusy sú bunky MDBK neoceniteľné pri skúmaní vírusovej patogenézy a hodnotení antivírusových stratégií.

Tkanivo
Obličky
Synonymá
  • MDBK (NBL-1)
  • NBL-1
  • Madin-Darby Bovine Kidney
  • Madin Darby Bovine Kidney

02Klasifikácia

Organizmus
Hovädzí
Sex
Muž
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelu podobné

04Identifikátory

Citácia
MDBK (NBL-1) (katalógové číslo Cytion 600396)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9913
Cellosaurus
CVCL_0421

05Prejav a náchylnosť

Vírusy
Táto línia bola testovaná a ukázalo sa, že je bez vírusu hnačky hovädzieho dobytka (BVD).
Náchylnosť na vírusy
Bunky sú citlivé na vírus bovinnej hnačky, vezikulárnej stomatitídy (kmeň Indiana), vírus infekčnej bovinnej rinotracheitídy, bovinný parvovírus, bovinný adenovírus I a III a vírus parainfluenzy 3.
Odolnosť voči vírusom
Poliovírus 2
Reverzná transkriptáza
Negatívne
Produkty
Keratín

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamín, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion číslo článku 820100a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10% FBS a 1% NEAA
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Hustota výsevu
1 x 104 buniek/cm2
Obnova kvapaliny
Každé 3 dni
Zotavenie po rozmrazení
Rýchle
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Plemeno / poddruh
Bos taurus
Vek darcu
Dospelí