MDBK (NBL-1)

Las células MDBK, abreviatura de «células renales bovinas Madin-Darby» (también conocidas como NBL-1), son un recurso biológico excepcional derivado de los riñones de ejemplares adultos de Bos taurus aparentemente sanos, específicamente machos. Estas células crecen de forma adherente y presentan una morfología de tipo epitelial.

Una de las aplicaciones más destacadas de las células MDBK radica en su capacidad para facilitar estudios in vitro sobre la expresión de antígenos derivados de Eimeria bovis en la membrana superficial de la célula huésped.
Además, las células MDBK se han utilizado en investigaciones centradas en la ubiquitinación y degradación de los transductores de señal y activadores de la transcripción 1 y 2 (STAT1 y STAT2) por parte de las proteínas V de los paramixovirus, como el virus simio 5 y el virus parainfluenza humano tipo 2.

Con un tiempo de duplicación promedio que oscila entre las 24 y las 35 horas, las células MDBK presentan una tasa de proliferación moderada. El establecimiento de la línea celular MDBK se remonta al 18 de febrero de 1957, cuando S.H. Madin y N.B. Darby lograron derivarla con éxito del riñón de un novillo adulto sano. Desde entonces, estas células se han convertido en un pilar fundamental de la investigación biológica, lo que ha permitido numerosos avances en diversos campos científicos.

El análisis del cariotipo de las células MDBK revela un número modal de cromosomas de 51, lo que indica un estado hipodiploide. Dentro de la población celular, la condición hipodiploide se manifiesta como un número de cromosomas de la línea madre de 2n = 60, con un componente 2S presente en aproximadamente el 5 % de las células. Además, suelen estar presentes entre 11 y 14 cromosomas marcadores, que comprenden una combinación de cromosomas metacéntricos, submetacéntricos y acro-telocéntricos. Cabe destacar que el cromosoma X parece monosómico, mientras que no se observan cromosomas HSR ni DM (doble minuto).

Las células MDBK presentan una amplia gama de aplicaciones en el ámbito de la investigación biológica. Su utilidad se extiende al cultivo celular en 3D, lo que permite a los científicos recrear estructuras complejas similares a los tejidos para estudios avanzados. Además, las células MDBK son de un valor incalculable en el cribado de alto rendimiento, ya que facilitan la selección rápida y eficiente de compuestos o agentes para diversos fines. Asimismo, estas células desempeñan un papel crucial en los estudios de toxicología, esenciales para evaluar la seguridad y los posibles efectos adversos de las sustancias en los organismos vivos.
En cuanto a la susceptibilidad viral, las células MDBK muestran receptividad a varios patógenos, entre ellos el virus de la estomatitis vesicular de Orsay (Indiana), el virus de la rinotraqueítis infecciosa bovina, el virus de la rinotraqueítis bovina, el parvovirus bovino, los adenovirus bovinos 2 y 3, el virus de la diarrea viral bovina 1 y el virus de la parainfluenza 3. Esta susceptibilidad a una amplia gama de virus hace que las células MDBK sean de gran valor para investigar la patogénesis viral y evaluar estrategias antivirales.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.