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MDBK (NBL-1)
Tissue
腎臟
Synonyms
MDBK (NBL-1), NBL-1, Madin-Darby Bovine Kidney, Madin Darby Bovine Kidney

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MDBK (NBL-1)

Cell line · Product number 600396

MDBK cells, short for Madin-Darby Bovine Kidney cells (also known as NBL-1), are an exceptional biological resource derived from the kidneys of apparently...

US$395.00excl. tax and shipping
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1

01General information

Description

MDBK 細胞,全稱為 Madin-Darby 牛腎細胞(亦稱 NBL-1),是一種源自外觀健康成年家牛(Bos taurus)腎臟的卓越生物資源,具體而言是來自雄性個體。這些細胞呈貼壁生長,並具有上皮樣形態。

MDBK 細胞的一項顯著應用,在於其能促進針對牛艾美耳蟲(Eimeria bovis)衍生抗原在宿主細胞表面膜上表達的體外研究。
此外,MDBK 細胞亦被用於研究副黏病毒(如第五型猿病毒和人類第二型副流感病毒)的 V 蛋白對信號轉導及轉錄激活因子 1 和 2(STAT1 和 STAT2)的泛素化與降解作用。

MDBK 細胞的平均倍增時間介於 24 至 35 小時之間,增殖速率屬中等。 MDBK細胞系的建立可追溯至1957年2月18日,當時S.H. Madin與N.B. Darby成功從一頭健康成年公牛的腎臟中分離出該細胞系。自此,這些細胞已成為生物研究的基石,促成各科學領域的眾多突破。

MDBK細胞的核型分析顯示,其模態染色體數為51,表明處於低二倍體狀態。在細胞群中,這種低二倍體狀態表現為幹線染色體數為2n = 60,約5%的細胞中存在2S成分。 此外,通常存在 11 至 14 條標記染色體,包含中著絲點染色體、次中著絲點染色體及端著絲點染色體的組合。值得注意的是,X 染色體呈現單體性,且未觀察到 HSR 染色體或 DM(雙分鐘染色體)。

MDBK 細胞在生物研究領域展現出廣泛的應用。其用途延伸至 3D 細胞培養,使科學家能夠重現複雜的類組織結構,以進行深入研究。 此外,MDBK 細胞在高通量篩選中具有不可或缺的價值,有助於快速且高效地篩選用於各種目的的化合物或製劑。同時,這些細胞在毒理學研究中也扮演著關鍵角色,對於評估物質對生物體的安全性及潛在不良影響至關重要。
就病毒易感性而言,MDBK細胞對多種病原體均具易感性,包括奧塞(印第安納)水疱性口炎病毒、傳染性牛鼻氣管炎病毒、牛鼻氣管炎病毒、牛細小病毒、 牛腺病毒 2 型和 3 型、牛病毒性腹瀉病毒 1 型,以及副流感病毒 3 型。這種對多種病毒的易感性,使 MDBK 細胞在研究病毒致病機制及評估抗病毒策略方面具有不可或缺的價值。

Tissue
腎臟
Synonyms
  • MDBK (NBL-1)
  • NBL-1
  • Madin-Darby Bovine Kidney
  • Madin Darby Bovine Kidney

02Classification

Organism
Bovine
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
上皮樣

04Identifiers

Citation
MDBK (NBL-1) (Cytion 型號 600396)
NCBI TaxID
9913
Cellosaurus
CVCL_0421

05Expression and susceptibility

Viruses
該血統經檢測後,證實未檢出牛腹瀉病毒(BVD)。
Virus susceptibility
這些細胞易感於牛腹瀉病毒、水疱性口炎病毒(印第安納株)、傳染性牛鼻氣管炎病毒、牛細小病毒、牛腺病毒 I 型和 III 型,以及副流感病毒 3 型。
Virus resistance
小兒麻痺病毒 2 型
Reverse transcriptase
否
Products
角蛋白

06Handling and culture

Culture medium
EMEM(MEM Eagle),含 2 mM L-谷氨醯胺,含 2.2 g/L NaHCO₃,含 EBSS(Cytion 產品編號 820100a)
Incubation atmosphere

37°C,5% CO₂,加濕環境。

Supplements
在培養基中加入 10% FBS 和 1% NEAA
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
從貼壁細胞中移除舊培養基,並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS,T75培養瓶則使用5-10毫升。 接著,用 Accutase 完全覆蓋細胞,T25 培養瓶使用 1–2 毫升,T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘,使其脫附。 孵育後,將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮,然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液,將細胞重新懸浮於新鮮培養基中,並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。
Seeding density
1 × 10⁴ 個細胞/cm²
Fluid renewal
每 3 天
Post-thaw recovery
快速
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法,排除支原體污染的可能性。

為確保無細菌、真菌或酵母菌污染,每日均會對細胞培養物進行目視檢查。

Freeze medium
作為冷凍保存培養基,我們使用完全生長培養基(含 FBS)+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率,或使用 CM-1 (Cytion 型號 800100),該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑,可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
Storage conditions

若需長期保存,請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前,可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中,作為短期過渡步驟。

Shipping conditions

冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏,並裝於經驗證的隔熱包裝中,包裝內含有足夠的冷媒,以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後,請立即檢查容器,並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。

08Donor

Breed / subspecies
Bos taurus
Donor age
成人