MDBK (NBL-1)

MDBK rakud, lühend Madin-Darby Bovine Kidney rakud (tuntud ka kui NBL-1), on erakordne bioloogiline ressurss, mis on saadud näiliselt tervete täiskasvanud Bos tauruse, eriti isaste isendite neerudest. Need rakud kasvavad adherentselt ja neil on epiteelilaadne morfoloogia.

MDBK rakkude üks märkimisväärseid rakendusi seisneb selles, et nende abil on võimalik teha in vitro uuringuid Eimeria bovis'e antigeenide ekspressiooni kohta peremeesraku pinnamembraanil.
Lisaks on MDBK rakke kasutatud uuringutes, mis keskenduvad signaali transkriptsiooni muunduri ja aktivaatori 1 ja 2 (STAT1 ja STAT2) ubikvitinatsioonile ja lagundamisele paramüxoviiruste, näiteks simian virus five ja inimese parainfriinaviiruse tüüp 2, V valkude poolt.

MDBK rakud, mille keskmine kahekordistumisaeg on 24-35 tundi, on mõõdukalt proliferatiivsed. MDBK rakuliini loomine pärineb 18. veebruarist 1957, kui S.H. Madin ja N.B. Darby tuletasid selle edukalt terve täiskasvanud härja neerust. Sellest ajast alates on neist rakkudest saanud bioloogiliste uuringute nurgakivi, mis on võimaldanud arvukaid läbimurdeid erinevates teadusvaldkondades.

MDBK rakkude karyotüübi analüüs näitab, et nende modaalne kromosoomide arv on 51, mis viitab hüpodiploidsele seisundile. Rakupopulatsiooni sees väljendub hüpodiploidne seisund tüvirakkude kromosoomide arvuna 2n = 60, kusjuures 2S-komponent esineb ligikaudu 5%-l rakkudest. Lisaks on tavaliselt 11-14 markerkromosoomi, mis koosnevad metatsentriliste, submetatsentriliste ja akrotelotsentriliste kromosoomide kombinatsioonist. Eelkõige on x-kromosoom monosoomne, samas kui HSR-kromosoomid või DM-d (topeltminutid) puuduvad.

MDBK rakkudel on mitmesuguseid rakendusi bioloogiliste uuringute valdkonnas. Nende kasulikkus ulatub 3D-rakukultuurini, mis võimaldab teadlastel luua keerukaid koesarnaseid struktuure edasijõudnud uuringuteks. Lisaks sellele on MDBK rakud hindamatu väärtusega kõrge läbilaskevõimega sõeluuringutes, hõlbustades ühendite või ainete kiiret ja tõhusat sõelumist erinevatel eesmärkidel. Lisaks on neil rakkudel oluline roll toksikoloogiauuringutes, mis on olulised ainete ohutuse ja võimalike kahjulike mõjude hindamiseks elusorganismidele.
MDBK rakud on vastuvõtlikud mitmetele patogeenidele, sealhulgas Vesicular Stomatitis Orsay (Indiana) viirusele, veiste infektsioossele rinotrahheiidi viirusele, veiste rinotrahheiidi viirusele, veiste parvoviirusele, veiste adenoviirusele 2 ja 3, veiste viirusliku kõhulahtisuse viirusele 1 ja parainfriinaviirusele. Selline vastuvõtlikkus mitmesuguste viiruste suhtes muudab MDBK rakud hindamatuks viiruspatogeneesi uurimiseks ja viirusevastaste strateegiate hindamiseks.

37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele

Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest