الانتقال إلى المحتوى
MDBK (NBL-1)
الأنسجة
الكلى
المرادفات
MDBK (NBL-1), NBL-1, Madin-Darby Bovine Kidney, Madin Darby Bovine Kidney

المستندات

MDBK (NBL-1)

Cell line · رقم المنتج 600396

MDBK cells, short for Madin-Darby Bovine Kidney cells (also known as NBL-1), are an exceptional biological resource derived from the kidneys of apparently...

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن

التخصيص / التوصيات

متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

تُعد خلايا MDBK، وهي اختصار لخلايا الكلى البقريّة من نوع "مادين-دربي" (المعروفة أيضًا باسم NBL-1)، مصدرًا بيولوجيًا استثنائيًا مشتقًا من كلى من فصيلة البوس ثوروس البالغين الأصحاء على ما يبدو، وتحديدًا الذكور. تنمو هذه الخلايا بشكل ملتصق وتمتلك مورفولوجيا شبيهة بالظهارة.

يكمن أحد الاستخدامات الرائعة لخلايا MDBK في قدرتها على تسهيل الدراسات المختبرية حول التعبير عن المستضدات المشتقة من بكتيريا إيميريا بوفيس على غشاء سطح الخلية المضيفة.
بالإضافة إلى ذلك، استُخدمت خلايا MDBK في الدراسات التي تتمحور حول تحلل محول الإشارة ومنشط النسخ 1 و2 (STAT1 و STAT2) بواسطة البروتينات V لفيروسات البارامايكسوفيروسات، مثل فيروس سيميان فايف وفيروس نظير الإنفلونزا البشري من النوع 2.

مع متوسط زمن تضاعف يتراوح بين 24 إلى 35 ساعة، تُظهر خلايا MDBK معدل تكاثر معتدل. يعود تاريخ إنشاء خط خلايا MDBK إلى 18 فبراير 1957، عندما نجح كل من س. ه. مادن وإن. ب. داربي في استخلاصها من كلية ثور بالغ سليم. ومنذ ذلك الحين، أصبحت هذه الخلايا حجر الزاوية في الأبحاث البيولوجية، مما أتاح تحقيق العديد من الإنجازات في مختلف المجالات العلمية.

ويكشف تحليل النمط النووي لخلايا MDBK عن رقم كروموسوم نموذجي يبلغ 51، مما يشير إلى حالة ناقصة الصبغيات. وداخل مجموعة الخلايا، تظهر الحالة ناقصة الصبغيات الصبغية على شكل عدد كروموسومات جذعية 2n = 60، مع وجود مكون 2S في حوالي 5% من الخلايا. وعلاوة على ذلك، عادةً ما يكون هناك 11-14 كروموسومًا مؤشّرًا يتكون من مزيج من الكروموسومات الميترية، وتحت المركزية، والكروموسومات التيلوسومية. والجدير بالذكر أن كروموسوم x يبدو أحادي الصبغيات بينما لا توجد كروموسومات HSR أو كروموسومات DM (الدقائق المزدوجة).

تُظهر خلايا MDBK مجموعة من التطبيقات في مجال الأبحاث البيولوجية. وتمتد فائدتها لتشمل زراعة الخلايا ثلاثية الأبعاد، مما يمكّن العلماء من إعادة إنشاء هياكل معقدة تشبه الأنسجة لإجراء دراسات متقدمة. علاوة على ذلك، فإن خلايا MDBK لا تقدر بثمن في الفحص عالي الإنتاجية، مما يسهل الفحص السريع والفعال للمركبات أو العوامل لأغراض مختلفة. بالإضافة إلى ذلك، تلعب هذه الخلايا دورًا حاسمًا في دراسات علم السموم، وهي ضرورية لتقييم السلامة والآثار الضارة المحتملة للمواد على الكائنات الحية.
فيما يتعلق بالقابلية الفيروسية، تُظهر خلايا MDBK قابلية تقبّل العديد من مسببات الأمراض، بما في ذلك فيروس التهاب الفم الحويصلي الأورسي الحويصلي (إنديانا)، وفيروس التهاب الأنف البقري المعدي، وفيروس التهاب الأنف الأنفي البقري، وفيروس بارفو البقري، والفيروس الغدي البقري 2 و3، وفيروس الإسهال الفيروسي البقري 1، وفيروس نظير الإنفلونزا الثالث. هذه القابلية للتأثر بمجموعة متنوعة من الفيروسات تجعل خلايا MDBK لا تقدر بثمن لدراسة التسبب في الفيروسات وتقييم الاستراتيجيات المضادة للفيروسات.

الأنسجة
الكلى
المرادفات
  • MDBK (NBL-1)
  • NBL-1
  • Madin-Darby Bovine Kidney
  • Madin Darby Bovine Kidney

02التصنيف

كائن حي
البقري
الجنس
ذكر
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
شبيه بالظهارة

04المعرّفات

المرجع
MDBK (NBL-1) (كتالوج سيتيون رقم 600396)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9913
سيلوصور
CVCL_0421

05التعبير والقابلية للإصابة

الفيروسات
تم اختبار السلالة وتبين أنها خالية من فيروس الإسهال البقري (BVD).
قابلية الإصابة بالفيروس
الخلايا عرضة للإصابة بفيروس الإسهال البقري، والتهاب الفم الحويصلي (سلالة إنديانا)، وفيروس التهاب الأنف البقري المعدي، وفيروس بارفو البقري، والفيروس الغدي البقري الأول والثالث، وفيروس نظير الإنفلونزا 3.
مقاومة الفيروسات
فيروس شلل الأطفال 2
إنزيم النسخ العكسي
سلبي
المنتجات
الكيراتين

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
EMEM (MEM Eagle)، ث: 2 ميلي مولار-جلوتامين، ث: 2.2 جم/لتر NaHCO3، ث: EBSS (رقم المادة 820100a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
يُضاف إلى الوسط 10٪ من كريات الدم الحمراء و1٪ من حمض النيتروز الأميني
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
كثافة البذر
1 × 104 خلية/سم2
تجديد السوائل
كل 3 أيام
التعافي بعد ذوبان الجليد
سريع
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

السلالة / النوع الفرعي
بوس توروس
عمر المتبرع
للبالغين