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MDBK (NBL-1)
Pañuelo de papel
Riñón
Sinónimos
MDBK (NBL-1), NBL-1, Madin-Darby Bovine Kidney, Madin Darby Bovine Kidney

Documentos

MDBK (NBL-1)

Cell line · Número de producto 600396

MDBK cells, short for Madin-Darby Bovine Kidney cells (also known as NBL-1), are an exceptional biological resource derived from the kidneys of apparently...

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01Información general

Descripción

Las células MDBK, abreviatura de Madin-Darby Bovine Kidney cells (también conocidas como NBL-1), son un recurso biológico excepcional derivado de los riñones de Bos taurus adultos aparentemente sanos, concretamente de individuos machos. Estas células crecen de forma adherente y poseen una morfología de tipo epitelial.

Una de las aplicaciones destacables de las células MDBK reside en su capacidad para facilitar estudios in vitro sobre la expresión de antígenos derivados de Eimeria bovis en la membrana de la superficie celular del huésped.
Además, las células MDBK se han empleado en investigaciones centradas en la ubiquitinación y degradación del transductor de señales y activador de la transcripción 1 y 2 (STAT1 y STAT2) por las proteínas V de paramixovirus, como el virus simio cinco y el virus de la parainfluenza humana de tipo 2.

Con un tiempo medio de duplicación que oscila entre 24 y 35 horas, las células MDBK presentan una tasa de proliferación moderada. El establecimiento de la línea celular MDBK se remonta al 18 de febrero de 1957, cuando S.H. Madin y N.B. Darby la obtuvieron con éxito del riñón de un buey adulto sano. Desde entonces, estas células se han convertido en una piedra angular de la investigación biológica, permitiendo numerosos avances en diversos campos científicos.

El análisis del cariotipo de las células MDBK revela un número cromosómico modal de 51, lo que indica un estado hipodiploide. Dentro de la población celular, el estado hipodiploide se manifiesta como un número cromosómico de la línea madre de 2n = 60, con un componente 2S presente en aproximadamente el 5% de las células. Además, suelen estar presentes entre 11 y 14 cromosomas marcadores, que comprenden una combinación de cromosomas metacéntricos, submetacéntricos y acrotelocéntricos. En particular, el cromosoma x parece monosómico, mientras que no se observan cromosomas HSR ni DM (doble minutos).

Las células MDBK presentan una amplia gama de aplicaciones en el ámbito de la investigación biológica. Su utilidad se extiende al cultivo celular en 3D, lo que permite a los científicos recrear estructuras complejas similares a tejidos para estudios avanzados. Además, las células MDBK son muy valiosas para el cribado de alto rendimiento, ya que facilitan el cribado rápido y eficaz de compuestos o agentes para diversos fines. Además, estas células desempeñan un papel crucial en los estudios toxicológicos, esenciales para evaluar la seguridad y los posibles efectos adversos de las sustancias en los organismos vivos.
En cuanto a la susceptibilidad viral, las células MDBK demuestran receptividad a varios patógenos, como el virus de la estomatitis vesicular de Orsay (Indiana), el virus de la rinotraqueitis infecciosa bovina, el virus de la rinotraqueitis bovina, el parvovirus bovino, los adenovirus bovinos 2 y 3, el virus de la diarrea viral bovina 1 y el virus de la parainfluenza tres. Esta susceptibilidad a una amplia gama de virus hace que las células MDBK sean inestimables para investigar la patogénesis viral y evaluar estrategias antivirales.

Pañuelo de papel
Riñón
Sinónimos
  • MDBK (NBL-1)
  • NBL-1
  • Madin-Darby Bovine Kidney
  • Madin Darby Bovine Kidney

02Clasificación

Organismo
Bovino
Sexo
Hombre
Propiedades de crecimiento
Adherente
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
De tipo epitelial

04Identificadores

Referencia
MDBK (NBL-1) (número de catálogo de Cytion 600396)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9913
Cellosaurus
CVCL_0421

05Expresión y susceptibilidad

Virus
La línea se sometió a pruebas y se demostró que estaba libre del virus de la diarrea bovina (BVD).
Susceptibilidad a los virus
Las células son sensibles al virus de la diarrea bovina, a la estomatitis vesicular (cepa Indiana), al virus de la rinotraqueitis infecciosa bovina, al parvovirus bovino, a los adenovirus bovinos I y III y al virus de la parainfluenza 3.
Resistencia a los virus
Poliovirus 2
Transcriptasa inversa
Negativo
Productos
Queratina

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (número de artículo de Cytion 820100a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Suplementar el medio con un 10% de FBS y un 1% de NEAA
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Densidad de siembra
1 x 104 células/cm2
Renovación de fluidos
Cada 3 días
Recuperación tras la descongelación
Rápido
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Raza / subespecie
Bos taurus
Edad del donante
Adultos