MDBK (NBL-1)

Les cellules MDBK, abréviation de « Madin-Darby Bovine Kidney » (également connues sous le nom de NBL-1), constituent une ressource biologique exceptionnelle dérivée des reins de Bos taurus adultes apparemment en bonne santé, plus précisément de mâles. Ces cellules se développent en adhésion et présentent une morphologie de type épithélial.

L’une des applications remarquables des cellules MDBK réside dans leur capacité à faciliter les études in vitro sur l’expression d’antigènes dérivés d’Eimeria bovis à la surface de la membrane cellulaire de l’hôte.
De plus, les cellules MDBK ont été utilisées dans des recherches portant sur l’ubiquitination et la dégradation des transducteurs de signal et activateurs de transcription 1 et 2 (STAT1 et STAT2) par les protéines V de paramyxovirus, tels que le virus simien de type 5 et le virus parainfluenza humain de type 2.

Avec un temps de doublement moyen variant de 24 à 35 heures, les cellules MDBK présentent un taux de prolifération modéré. La création de la lignée cellulaire MDBK remonte au 18 février 1957, lorsque S.H. Madin et N.B. Darby ont réussi à l’isoler à partir du rein d’un bouvillon adulte en bonne santé. Depuis lors, ces cellules sont devenues une pierre angulaire de la recherche biologique, permettant de nombreuses percées dans divers domaines scientifiques.

L’analyse du caryotype des cellules MDBK révèle un nombre modal de chromosomes de 51, ce qui indique un état hypodiploïde. Au sein de la population cellulaire, cet état hypodiploïde se manifeste par un nombre de chromosomes de la lignée souche de 2n = 60, avec une composante 2S présente dans environ 5 % des cellules. De plus, on observe généralement la présence de 11 à 14 chromosomes marqueurs, comprenant une combinaison de chromosomes métacentriques, sous-métacentriques et acro-télocentriques. Il convient de noter que le chromosome X semble monosomique, tandis qu’aucun chromosome HSR ni DM (double minute) n’est observé.

Les cellules MDBK présentent un large éventail d’applications dans le domaine de la recherche biologique. Leur utilité s’étend à la culture cellulaire en 3D, permettant aux scientifiques de recréer des structures complexes de type tissulaire pour des études avancées. De plus, les cellules MDBK sont d’une valeur inestimable dans le criblage à haut débit, facilitant le criblage rapide et efficace de composés ou d’agents à des fins diverses. Par ailleurs, ces cellules jouent un rôle crucial dans les études toxicologiques, essentielles pour évaluer l’innocuité et les effets indésirables potentiels de substances sur les organismes vivants.
En ce qui concerne la sensibilité virale, les cellules MDBK se montrent réceptives à plusieurs agents pathogènes, notamment le virus de la stomatite vésiculeuse d’Orsay (Indiana), le virus de la rhinotrachéite infectieuse bovine, le virus de la rhinotrachéite bovine, le parvovirus bovin, les adénovirus bovins 2 et 3, le virus de la diarrhée virale bovine de type 1 et le virus parainfluenza de type 3. Cette sensibilité à un large éventail de virus rend les cellules MDBK inestimables pour l’étude de la pathogenèse virale et l’évaluation des stratégies antivirales.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.