MDBK (NBL-1)

Komórki MDBK, skrót od Madin-Darby Bovine Kidney (znane również jako NBL-1), są wyjątkowym zasobem biologicznym pochodzącym z nerek pozornie zdrowych dorosłych osobników Bos taurus, w szczególności samców. Komórki te rosną przylegająco i mają morfologię podobną do nabłonka.

Jednym z niezwykłych zastosowań komórek MDBK jest ich zdolność do ułatwiania badań in vitro nad ekspresją antygenów pochodzących z Eimeria bovis na błonie powierzchniowej komórek gospodarza.
Dodatkowo, komórki MDBK zostały wykorzystane w badaniach skoncentrowanych na ubikwitynacji i degradacji transduktora sygnału i aktywatora transkrypcji 1 i 2 (STAT1 i STAT2) przez białka V paramyksowirusów, takich jak wirus sym sympansa 5 i ludzki wirus paragrypy typu 2.

Przy średnim czasie podwojenia wynoszącym od 24 do 35 godzin, komórki MDBK wykazują umiarkowany wskaźnik proliferacji. Powstanie linii komórkowej MDBK datuje się na 18 lutego 1957 roku, kiedy to S.H. Madin i N.B. Darby z powodzeniem wyprowadzili ją z nerki zdrowego dorosłego wołu. Od tego czasu komórki te stały się kamieniem węgielnym w badaniach biologicznych, umożliwiając liczne przełomy w różnych dziedzinach nauki.

Analiza kariotypu komórek MDBK ujawnia modalną liczbę chromosomów wynoszącą 51, co wskazuje na stan hipodiploidalny. W populacji komórek stan hipodiploidalny objawia się liczbą chromosomów macierzystych 2n = 60, przy czym składnik 2S występuje w około 5% komórek. Co więcej, zwykle obecnych jest 11-14 chromosomów markerowych, obejmujących kombinację chromosomów metacentrycznych, submetacentrycznych i akro-telocentrycznych. Warto zauważyć, że chromosom x wydaje się monosomiczny, podczas gdy nie obserwuje się chromosomów HSR ani DM (podwójnych minut).

Komórki MDBK wykazują szereg zastosowań w dziedzinie badań biologicznych. Ich użyteczność rozciąga się na hodowlę komórek 3D, umożliwiając naukowcom odtwarzanie złożonych struktur przypominających tkanki do zaawansowanych badań. Co więcej, komórki MDBK są nieocenione w badaniach przesiewowych o wysokiej przepustowości, ułatwiając szybkie i wydajne badania przesiewowe związków lub środków do różnych celów. Dodatkowo, komórki te odgrywają kluczową rolę w badaniach toksykologicznych, niezbędnych do oceny bezpieczeństwa i potencjalnego niekorzystnego wpływu substancji na organizmy żywe.
Jeśli chodzi o podatność na wirusy, komórki MDBK wykazują wrażliwość na kilka patogenów, w tym wirusa pęcherzykowego zapalenia jamy ustnej Orsay (Indiana), wirusa zakaźnego zapalenia nosa i tchawicy bydła, wirusa zapalenia nosa i tchawicy bydła, parwowirusa bydła, adenowirusa bydła 2 i 3, wirusa wirusowej biegunki bydła 1 i wirusa paragrypy 3. Ta podatność na różnorodne wirusy sprawia, że komórki MDBK są nieocenione w badaniu patogenezy wirusów i ocenie strategii przeciwwirusowych.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym