MDBK (NBL-1)

MDBK-solut, jotka ovat lyhenne sanoista Madin-Darby Bovine Kidney cells (tunnetaan myös nimellä NBL-1), ovat poikkeuksellinen biologinen resurssi, joka on peräisin näennäisesti terveiden aikuisten Bos taurus -nautojen munuaisista, erityisesti miespuolisista yksilöistä. Nämä solut kasvavat kiinni ja niillä on epiteelin kaltainen morfologia.

Yksi MDBK-solujen merkittävistä sovelluksista on niiden kyky helpottaa in vitro -tutkimuksia, joissa tutkitaan Eimeria bovis -bakteerista peräisin olevien antigeenien ilmentymistä isäntäsolujen pintakalvolla.
Lisäksi MDBK-soluja on käytetty tutkimuksissa, joissa on keskitytty paramyxovirusten, kuten simian virus 5:n ja ihmisen parainfluenssaviruksen tyyppi 2:n, V-proteiinien aiheuttamaan signaalinmuuntimen ja transkription aktivaattorin 1 ja 2 (STAT1 ja STAT2) ubikitinaatioon ja hajoamiseen.

MDBK-solujen keskimääräinen kaksinkertaistumisaika on 24-35 tuntia, ja ne lisääntyvät kohtalaisesti. MDBK-solulinja perustettiin 18. helmikuuta 1957, jolloin S.H. Madin ja N.B. Darby saivat sen onnistuneesti terveen aikuisen härän munuaisesta. Siitä lähtien näistä soluista on tullut biologisen tutkimuksen kulmakivi, joka on mahdollistanut lukuisia läpimurtoja eri tieteenaloilla.

MDBK-solujen karyotyyppianalyysi paljastaa, että niiden modaalinen kromosomimäärä on 51, mikä viittaa hypodiploidiseen tilaan. Solupopulaatiossa hypodiploidinen tila ilmenee kantakromosomilukuna 2n = 60, ja 2S-komponenttia esiintyy noin 5 prosentissa soluista. Lisäksi tyypillisesti esiintyy 11-14 merkkikromosomia, jotka koostuvat meta-, submeta- ja akro-telosentristen kromosomien yhdistelmästä. Huomattavaa on, että x-kromosomi vaikuttaa monosomiselta, eikä HSR-kromosomeja tai DM:iä (kaksoisminuutteja) havaita.

MDBK-soluilla on monia sovelluksia biologisen tutkimuksen alalla. Niiden hyöty ulottuu 3D-soluviljelyyn, jonka avulla tutkijat voivat luoda monimutkaisia kudoksen kaltaisia rakenteita edistyneempiä tutkimuksia varten. Lisäksi MDBK-solut ovat korvaamattomia korkean läpimenon seulonnassa, joka helpottaa yhdisteiden tai aineiden nopeaa ja tehokasta seulontaa eri tarkoituksiin. Lisäksi näillä soluilla on ratkaiseva rooli toksikologisissa tutkimuksissa, jotka ovat välttämättömiä arvioitaessa aineiden turvallisuutta ja mahdollisia haittavaikutuksia eläviin organismeihin.
Virusherkkyyden osalta MDBK-solut ovat vastaanottavaisia useille patogeeneille, kuten Vesicular stomatitis Orsay (Indiana) -virukselle, naudan tarttuvalle rinotrakeiittivirukselle, naudan rinotrakeiittivirukselle, naudan parvovirukselle, naudan adenoviruksille 2 ja 3, naudan virusripulivirukselle 1 ja parainfluenssa kolmosvirukselle. Tämä alttius monenlaisille viruksille tekee MDBK-soluista korvaamattomia viruspatogeneesin tutkimisessa ja viruslääkintästrategioiden arvioinnissa.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa