MDBK (NBL-1)

As células MDBK, abreviação de células renais bovinas Madin-Darby (também conhecidas como NBL-1), são um recurso biológico excepcional derivado dos rins de indivíduos adultos de Bos taurus aparentemente saudáveis, especificamente machos. Essas células crescem por adesão e possuem uma morfologia semelhante à epitelial.

Uma das aplicações notáveis das células MDBK reside em sua capacidade de facilitar estudos in vitro sobre a expressão de antígenos derivados de Eimeria bovis na membrana da superfície celular do hospedeiro.
Além disso, as células MDBK têm sido empregadas em investigações centradas na ubiquitinação e degradação dos transdutores de sinal e ativadores de transcrição 1 e 2 (STAT1 e STAT2) pelas proteínas V de paramixovírus, como o vírus símio 5 e o vírus parainfluenza humano tipo 2.

Com um tempo médio de duplicação que varia de 24 a 35 horas, as células MDBK apresentam uma taxa de proliferação moderada. O estabelecimento da linhagem celular MDBK remonta a 18 de fevereiro de 1957, quando S.H. Madin e N.B. Darby conseguiram isolá-la com sucesso do rim de um novilho adulto saudável. Desde então, essas células tornaram-se um pilar da pesquisa biológica, possibilitando inúmeros avanços em diversos campos científicos.

A análise do cariótipo das células MDBK revela um número modal de cromossomos de 51, indicando um estado hipodiplóide. Dentro da população celular, a condição hipodiplóide se manifesta como um número de cromossomos da linhagem-tronco de 2n = 60, com um componente 2S presente em aproximadamente 5% das células. Além disso, normalmente estão presentes de 11 a 14 cromossomos marcadores, compreendendo uma combinação de cromossomos metacêntricos, submetacêntricos e acro-telocêntricos. Notavelmente, o cromossomo X apresenta monossomia, enquanto não são observados cromossomos HSR nem DM’s (double minutes).

As células MDBK apresentam uma ampla gama de aplicações no campo da pesquisa biológica. Sua utilidade se estende à cultura celular 3D, permitindo que os cientistas recriem estruturas complexas semelhantes a tecidos para estudos avançados. Além disso, as células MDBK são inestimáveis na triagem de alto rendimento, facilitando a triagem rápida e eficiente de compostos ou agentes para diversos fins. Adicionalmente, essas células desempenham um papel crucial em estudos toxicológicos, essenciais para avaliar a segurança e os possíveis efeitos adversos de substâncias em organismos vivos.
No que diz respeito à suscetibilidade viral, as células MDBK demonstram receptividade a diversos patógenos, incluindo o vírus da estomatite vesicular de Orsay (Indiana), o vírus da rinotraqueíte infecciosa bovina, o vírus da rinotraqueíte bovina, o parvovírus bovino, adenovírus bovino 2 e 3, vírus da diarreia viral bovina 1 e vírus da parainfluenza 3. Essa suscetibilidade a uma ampla gama de vírus torna as células MDBK inestimáveis para a investigação da patogênese viral e a avaliação de estratégias antivirais.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.