İçeriğe atla
NSO
Doku
Plazma hücreli miyelom, hibridoma füzyon partneri
Hastalık
Fare multipl miyelomu
Eş anlamlılar
NSO, NS/0, NS/O, NS-0, P3-NS0, P3/NS0, P3/NSO

NSO

Cell line · Ürün numarası 400109

NS0 is a murine myeloma cell line derived from a non-secreting variant of a mouse plasmacytoma. It is widely used in biotechnology and pharmaceutical manu...

€430.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

NS0, fare plazmasitomunun salgılamayan bir varyantından türetilen bir murin miyelom hücre hattıdır. Rekombinant monoklonal antikorların ve diğer terapötik proteinlerin üretimi için biyoteknoloji ve farmasötik üretiminde yaygın olarak kullanılmaktadır. NS0 hücreleri süspansiyon kültürü için uyarlanmıştır ve serumsuz, kimyasal olarak tanımlanmış ortamlarda büyüyebilir, bu da onları mevcut iyi üretim uygulaması (cGMP) koşulları altında büyük ölçekli biyoişleme için çok uygun hale getirir. Özellikle güçlü memeli ekspresyon vektörleri ve metotreksat (MTX) seleksiyonuna dayalı olanlar gibi amplifikasyon sistemleri ile birlikte kullanıldıklarında, yüksek transfeksiyon verimlilikleri ve yüksek protein ekspresyon verimi elde etme yetenekleri ile bilinirler.

Protein üretimindeki faydalarına rağmen, NS0 hücreleri murin kökenlidir ve bu da ifade edilen proteinler üzerinde insan olmayan glikozilasyon modellerinin varlığı da dahil olmak üzere bazı sınırlamalar getirir. Bu farklılıklar, klinik uygulamalarda dikkate alınması gereken immünojenisite ve farmakokinetiği etkileyebilir. Bununla birlikte, NS0'dan türetilen ürünler ruhsat onayı almıştır ve klinik kullanımdadır; bu da hattın sağlamlığının ve ölçeklenebilirliğinin altını çizmektedir. NS0 hücreleri tümörijenik değildir ve endojen immünoglobulin ekspresyonundan yoksundur, bu da rekombinant antikor üretim iş akışlarında doğal antikor dizilerinin kontamine olma riskini azaltır.

Doku
Plazma hücreli miyelom, hibridoma füzyon partneri
Hastalık
Fare multipl miyelomu
Eş anlamlılar
  • NSO
  • NS/0
  • NS/O
  • NS-0
  • P3-NS0
  • P3/NS0
  • P3/NSO

02Sınıflandırma

Canlı
Fare
Cinsiyet
Kadın
Büyüme özellikleri
Askıya alma
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Hücre türü
Lenfoblastoid

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
NSO (Cytion katalog numarası 400109)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
10090
Cellosaurus
CVCL_3940

05İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
RPMI 1640, w: 2.0 mM stabil Glutamin, w: 2.0 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820700a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.