NSO

NS0 es una línea celular de mieloma murino derivada de una variante no secretora de un plasmocitoma de ratón. Se utiliza ampliamente en biotecnología y en la fabricación de productos farmacéuticos para la producción de anticuerpos monoclonales recombinantes y otras proteínas terapéuticas. Las células NS0 están adaptadas para el cultivo en suspensión y pueden crecer en medios sin suero y químicamente definidos, lo que las hace idóneas para bioprocesos a gran escala bajo condiciones de buenas prácticas de fabricación actuales (cGMP). Son conocidas por su alta eficiencia de transfección y su capacidad para alcanzar altos rendimientos de expresión proteica, particularmente cuando se utilizan junto con vectores de expresión mamíferos potentes y sistemas de amplificación, como los basados en la selección con metotrexato (MTX).

A pesar de su utilidad en la producción de proteínas, las células NS0 son de origen murino, lo que introduce algunas limitaciones, incluida la presencia de patrones de glicosilación no humanos en las proteínas expresadas. Estas diferencias pueden influir en la inmunogenicidad y la farmacocinética, lo cual es un factor a considerar en las aplicaciones clínicas. No obstante, los productos derivados de NS0 han recibido aprobación regulatoria y se utilizan clínicamente, lo que subraya la robustez y escalabilidad de esta línea celular. Las células NS0 no son tumorigénicas y carecen de expresión endógena de inmunoglobulinas, lo que reduce el riesgo de contaminación por secuencias de anticuerpos nativos en los flujos de trabajo de producción de anticuerpos recombinantes.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.