NSO

NS0 è una linea cellulare di mieloma murino derivata da una variante non secernente di un plasmocitoma di topo. È ampiamente utilizzata nelle biotecnologie e nella produzione farmaceutica per la produzione di anticorpi monoclonali ricombinanti e altre proteine terapeutiche. Le cellule NS0 sono adatte alla coltura in sospensione e possono crescere in terreni privi di siero e chimicamente definiti, il che le rende adatte a bioprocessi su larga scala in condizioni di buone pratiche di fabbricazione (cGMP). Sono noti per la loro elevata efficienza di trasfezione e per la capacità di ottenere alti rendimenti di espressione proteica, in particolare se utilizzati insieme a vettori di espressione di mammiferi forti e a sistemi di amplificazione come quelli basati sulla selezione del metotrexato (MTX).

Nonostante la loro utilità nella produzione di proteine, le cellule NS0 sono di origine murina, il che introduce alcune limitazioni, tra cui la presenza di modelli di glicosilazione non umani nelle proteine espresse. Queste differenze possono influenzare l'immunogenicità e la farmacocinetica, il che rappresenta una considerazione nelle applicazioni cliniche. Ciononostante, i prodotti derivati da NS0 hanno ricevuto l'approvazione normativa e sono in uso clinico, sottolineando la robustezza e la scalabilità della linea. Le cellule NS0 non sono tumorigeniche e non esprimono immunoglobuline endogene, riducendo il rischio di contaminazione delle sequenze di anticorpi nativi nei flussi di produzione di anticorpi ricombinanti.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia