Przejdź do treści
NSO
Chusteczka
Szpiczak plazmocytowy, partner fuzji hybrydoma
Choroba
Szpiczak mnogi u myszy
Synonimy
NSO, NS/0, NS/O, NS-0, P3-NS0, P3/NS0, P3/NSO

Dokumenty

NSO

Cell line · Numer produktu 400109

NS0 is a murine myeloma cell line derived from a non-secreting variant of a mouse plasmacytoma. It is widely used in biotechnology and pharmaceutical manu...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

NS0 to linia komórek szpiczaka mysiego pochodząca z niewydzielającego wariantu mysiego plazmocytoma. Jest ona szeroko stosowana w biotechnologii i produkcji farmaceutycznej do produkcji rekombinowanych przeciwciał monoklonalnych i innych białek terapeutycznych. Komórki NS0 są przystosowane do hodowli w zawiesinie i mogą rosnąć w wolnych od surowicy, chemicznie zdefiniowanych pożywkach, dzięki czemu dobrze nadają się do bioprzetwarzania na dużą skalę w warunkach aktualnej dobrej praktyki produkcyjnej (cGMP). Są one znane z wysokiej wydajności transfekcji i zdolności do osiągania wysokiej wydajności ekspresji białek, szczególnie w połączeniu z silnymi wektorami ekspresji ssaków i systemami amplifikacji, takimi jak te oparte na selekcji metotreksatem (MTX).

Pomimo ich użyteczności w produkcji białek, komórki NS0 są pochodzenia mysiego, co wprowadza pewne ograniczenia, w tym obecność innych niż ludzkie wzorców glikozylacji na wyrażanych białkach. Różnice te mogą wpływać na immunogenność i farmakokinetykę, co jest istotne w zastosowaniach klinicznych. Niemniej jednak, produkty pochodzące z NS0 zostały zatwierdzone przez organy regulacyjne i są stosowane klinicznie, co podkreśla solidność i skalowalność linii. Komórki NS0 są nienowotworowe i pozbawione ekspresji endogennych immunoglobulin, co zmniejsza ryzyko zanieczyszczenia natywnych sekwencji przeciwciał w procesach produkcji rekombinowanych przeciwciał.

Chusteczka
Szpiczak plazmocytowy, partner fuzji hybrydoma
Choroba
Szpiczak mnogi u myszy
Synonimy
  • NSO
  • NS/0
  • NS/O
  • NS-0
  • P3-NS0
  • P3/NS0
  • P3/NSO

02Klasyfikacja

Organizm
Mysz
Seks
Kobieta
Właściwości związane ze wzrostem
Zawieszenie
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Typ komórki
Limfoblastoid

04Identyfikatory

Źródło
NSO (numer katalogowy Cytion 400109)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_3940

05Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnej glutaminy, w: 2,0 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820700a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.