Preskoči na vsebino
NSO
Tkivo
Plazmocelični mielom, hibridomski fuzijski partner
Bolezen
Mišji multipli mielom
Sinonimi
NSO, NS/0, NS/O, NS-0, P3-NS0, P3/NS0, P3/NSO

Dokumenti

NSO

Cell line · Številka izdelka 400109

NS0 is a murine myeloma cell line derived from a non-secreting variant of a mouse plasmacytoma. It is widely used in biotechnology and pharmaceutical manu...

€430.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

NS0 je mišja mielomska celična linija, pridobljena iz neizločajoče različice mišjega plazmocitoma. Uporablja se v biotehnologiji in farmacevtski proizvodnji za proizvodnjo rekombinantnih monoklonskih protiteles in drugih terapevtskih proteinov. Celice NS0 so prilagojene za suspenzijsko gojenje in lahko rastejo v kemično opredeljenih medijih brez seruma, zato so zelo primerne za obsežno biološko obdelavo v skladu z veljavno dobro proizvodno prakso (cGMP). Znane so po visoki učinkovitosti transfekcije in sposobnosti doseganja visokih donosov izražanja beljakovin, zlasti če se uporabljajo v povezavi z močnimi sesalskimi ekspresijskimi vektorji in sistemi za ojačevanje, kot so tisti, ki temeljijo na selekciji metotreksata (MTX).

Kljub njihovi uporabnosti pri proizvodnji beljakovin so celice NS0 mišjega izvora, kar prinaša nekatere omejitve, vključno s prisotnostjo nečloveških vzorcev glikozilacije na izraženih beljakovinah. Te razlike lahko vplivajo na imunogenost in farmakokinetiko, kar je pomembno pri klinični uporabi. Kljub temu so bili izdelki, pridobljeni iz NS0, odobreni s strani regulativnih organov in se že klinično uporabljajo, kar potrjuje zanesljivost in razširljivost linije. Celice NS0 niso tumorogene in nimajo izražanja endogenih imunoglobulinov, kar zmanjšuje tveganje kontaminacije naravnih zaporedij protiteles v delovnih postopkih proizvodnje rekombinantnih protiteles.

Tkivo
Plazmocelični mielom, hibridomski fuzijski partner
Bolezen
Mišji multipli mielom
Sinonimi
  • NSO
  • NS/0
  • NS/O
  • NS-0
  • P3-NS0
  • P3/NS0
  • P3/NSO

02Razvrstitev

Organizem
Miška
Seks
Ženska
Lastnosti rasti
Vzmetenje
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Vrsta celice
Limfoblastoidni

04Identifikatorji

Navajanje vira
NSO (kataloška številka Cytion 400109)
Davčna identifikacijska številka NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_3940

05Ravnanje in gojenje

Gojišče
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnega glutamina, w: 2,0 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820700a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.