Přejít na obsah
NSO
Tkáň
Plazmocytární myelom, partnerská hybridomová fúze
Nemoc
Myší mnohočetný myelom
Synonyma
NSO, NS/0, NS/O, NS-0, P3-NS0, P3/NS0, P3/NSO

Dokumenty

NSO

Cell line · Číslo výrobku 400109

NS0 is a murine myeloma cell line derived from a non-secreting variant of a mouse plasmacytoma. It is widely used in biotechnology and pharmaceutical manu...

€430.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

NS0 je myší myelomová buněčná linie odvozená z nesekreční varianty myšího plazmocytomu. Je široce používána v biotechnologiích a farmaceutické výrobě pro výrobu rekombinantních monoklonálních protilátek a dalších terapeutických proteinů. Buňky NS0 jsou uzpůsobeny pro suspenzní kultivaci a mohou růst v chemicky definovaných médiích bez séra, takže jsou vhodné pro rozsáhlé bioprocesy za současných podmínek správné výrobní praxe (cGMP). Jsou známé svou vysokou účinností transfekce a schopností dosahovat vysokých výtěžků exprese proteinů, zejména při použití ve spojení se silnými savčími expresními vektory a amplifikačními systémy, jako jsou systémy založené na metotrexátové (MTX) selekci.

Navzdory jejich užitečnosti při produkci proteinů jsou NS0 buňky myšího původu, což přináší některá omezení, včetně přítomnosti jiných než lidských glykosylačních vzorů na exprimovaných proteinech. Tyto rozdíly mohou ovlivnit imunogenicitu a farmakokinetiku, což je v klinických aplikacích na pováženou. Nicméně produkty odvozené od NS0 byly schváleny regulačními orgány a používají se v klinické praxi, což podtrhuje robustnost a rozšiřitelnost této linie. Buňky NS0 nejsou nádorové a postrádají expresi endogenních imunoglobulinů, což snižuje riziko kontaminace nativních protilátkových sekvencí v pracovních postupech výroby rekombinantních protilátek.

Tkáň
Plazmocytární myelom, partnerská hybridomová fúze
Nemoc
Myší mnohočetný myelom
Synonyma
  • NSO
  • NS/0
  • NS/O
  • NS-0
  • P3-NS0
  • P3/NS0
  • P3/NSO

02Klasifikace

Organismus
Myš
Sex
Žena
Růstové vlastnosti
Odpružení
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Typ buňky
Lymfoblastoidní

04Identifikátory

Citace
NSO (katalogové číslo Cytion 400109)
Daňové identifikační číslo NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_3940

05Manipulace a chov

Pěstovací médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilní glutamin, w: 2,0 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.