Tartalomra ugrás
NSO
Szövet
Plazmasejtes myeloma, hibridoma fúziós partner
Betegség
Egér multiplex myeloma
Szinonimák
NSO, NS/0, NS/O, NS-0, P3-NS0, P3/NS0, P3/NSO

Dokumentumok

NSO

Cell line · Termékszám 400109

NS0 is a murine myeloma cell line derived from a non-secreting variant of a mouse plasmacytoma. It is widely used in biotechnology and pharmaceutical manu...

€430.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

Az NS0 egy egér myeloma sejtvonal, amely egy egér plazmacitóma nem szekretáló változatából származik. Széles körben használják a biotechnológiában és a gyógyszergyártásban rekombináns monoklonális antitestek és más terápiás fehérjék előállítására. Az NS0 sejtek szuszpenziós tenyésztésre alkalmasak, és képesek szérummentes, kémiailag meghatározott táptalajon növekedni, így jól alkalmazhatók a jelenlegi helyes gyártási gyakorlat (cGMP) szerinti nagyüzemi biotechnológiai feldolgozásra. Ismertek magas transzfekciós hatékonyságukról és magas fehérjeexpressziós hozam elérésének képességéről, különösen akkor, ha erős emlős expressziós vektorokkal és erősítő rendszerekkel, például metotrexát (MTX) szelekción alapuló amplifikációs rendszerekkel együtt használják őket.

A fehérje előállításában való hasznosságuk ellenére az NS0 sejtek egér eredetűek, ami bizonyos korlátokat jelent, beleértve a nem emberi glikozilációs mintázat jelenlétét az expresszált fehérjéken. Ezek a különbségek befolyásolhatják az immunogenitást és a farmakokinetikát, ami szempont a klinikai alkalmazásokban. Mindazonáltal az NS0-ból származó termékek megkapták a hatósági jóváhagyást és klinikai használatban vannak, ami alátámasztja a vonal robusztusságát és skálázhatóságát. Az NS0 sejtek nem tumorogének és nem rendelkeznek endogén immunglobulin expresszióval, ami csökkenti a natív antitest szekvenciák szennyeződésének kockázatát a rekombináns antitestgyártási munkafolyamatokban.

Szövet
Plazmasejtes myeloma, hibridoma fúziós partner
Betegség
Egér multiplex myeloma
Szinonimák
  • NSO
  • NS/0
  • NS/O
  • NS-0
  • P3-NS0
  • P3/NS0
  • P3/NSO

02Osztályozás

Organizmus
Egér
Szex
Nő
Növekedési tulajdonságok
Felfüggesztés
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Sejttípus
Lymphoblastoid

04Azonosítók

Hivatkozás
NSO (Cytion katalógusszám: 400109)
NCBI adóazonosító szám
10090
Cellosaurus
CVCL_3940

05Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabil glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion 820700a cikkszám)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.