Mine otse sisu juurde
NSO
Kude
Plasmarakkude müeloom, hübriidoomi fusioonipartner
Haigus
Hiirte hulgimüeloom
Sünonüümid
NSO, NS/0, NS/O, NS-0, P3-NS0, P3/NS0, P3/NSO

Dokumendid

NSO

Cell line · Toote number 400109

NS0 is a murine myeloma cell line derived from a non-secreting variant of a mouse plasmacytoma. It is widely used in biotechnology and pharmaceutical manu...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

NS0 on hiirte müeloomi rakuliin, mis on saadud hiire plasmasütoomi mittesekreteerivast variandist. Seda kasutatakse laialdaselt biotehnoloogias ja farmaatsiatööstuses rekombinantsete monoklonaalsete antikehade ja muude terapeutiliste valkude tootmiseks. NS0 rakud on kohandatud suspensioonikultuuriks ja suudavad kasvada seerumivabas, keemiliselt määratletud keskkonnas, mistõttu sobivad need hästi suuremahuliseks biotöötluseks praeguste heade tootmistavade (cGMP) tingimustes. Nad on tuntud oma kõrge transfektsioonitõhususe ja võime poolest saavutada kõrge valkude ekspressiooni saagis, eriti kui neid kasutatakse koos tugevate imetajate ekspressioonivektorite ja võimendussüsteemidega, nagu näiteks metotreksaadi (MTX) selektsioonil põhinevate süsteemidega.

Vaatamata nende kasulikkusele valkude tootmisel on NS0 rakud hiirte päritolu, mis toob kaasa mõned piirangud, sealhulgas mitteinimliku glükosüülimustri olemasolu ekspresseeritud valkudel. Need erinevused võivad mõjutada immunogeensust ja farmakokineetikat, mis on kliiniliste rakenduste puhul oluline. Sellegipoolest on NS0-st saadud tooted saanud regulatiivse heakskiidu ja on kliinilises kasutuses, mis rõhutab selle liini tugevust ja skaleeritavust. NS0 rakud ei ole kasvajalised ja neil puudub endogeenne immunoglobuliini ekspressioon, mis vähendab rekombinantsete antikehade tootmise tööprotsessis natiivsete antikehade saasteainete tekkimise ohtu.

Kude
Plasmarakkude müeloom, hübriidoomi fusioonipartner
Haigus
Hiirte hulgimüeloom
Sünonüümid
  • NSO
  • NS/0
  • NS/O
  • NS-0
  • P3-NS0
  • P3/NS0
  • P3/NSO

02Klassifikatsioon

Organism
Hiir
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Vedrustus
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Rakutüüp
Lümfoblastoid

04Tunnused

Viide
NSO (Cytioni katalooginumber 400109)
NCBI maksukood
10090
Cellosaurus
CVCL_3940

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.