NSO

NS0 ist eine Maus-Myelom-Zelllinie, die von einer nicht sezernierenden Variante eines Maus-Plasmozytoms abstammt. Sie wird in der Biotechnologie und der pharmazeutischen Produktion für die Herstellung von rekombinanten monoklonalen Antikörpern und anderen therapeutischen Proteinen verwendet. NS0-Zellen sind für die Suspensionskultur geeignet und können in serumfreien, chemisch definierten Medien wachsen, wodurch sie sich gut für groß angelegte Bioprozesse unter cGMP-Bedingungen (current good manufacturing practice) eignen. Sie sind bekannt für ihre hohe Transfektionseffizienz und ihre Fähigkeit, hohe Proteinausbeuten zu erzielen, insbesondere wenn sie in Verbindung mit starken Säugetier-Expressionsvektoren und Amplifikationssystemen verwendet werden, wie z. B. solchen, die auf Methotrexat (MTX)-Selektion basieren.

Trotz ihrer Nützlichkeit für die Proteinproduktion sind NS0-Zellen von Mäusen abstammend, was einige Einschränkungen mit sich bringt, darunter das Vorhandensein nicht menschlicher Glykosylierungsmuster auf den exprimierten Proteinen. Diese Unterschiede können die Immunogenität und Pharmakokinetik beeinflussen, was bei klinischen Anwendungen zu berücksichtigen ist. Nichtsdestotrotz haben NS0-Produkte die behördliche Zulassung erhalten und werden bereits klinisch eingesetzt, was die Robustheit und Skalierbarkeit der Linie unterstreicht. NS0-Zellen sind nicht tumorigen und besitzen keine endogene Immunglobulinexpression, was das Risiko einer Kontamination nativer Antikörpersequenzen in rekombinanten Antikörperproduktionsabläufen verringert.

37°C, 5%_CO2, befeuchtete Atmosphäre.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen

Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung