Siirry sisältöön
NSO
Kudos
Plasmasolumyelooma, hybridooman fuusiokumppani
Sairaus
Hiiren multippeli myelooma
Synonyymit
NSO, NS/0, NS/O, NS-0, P3-NS0, P3/NS0, P3/NSO

Asiakirjat

NSO

Cell line · Tuotenumero 400109

NS0 is a murine myeloma cell line derived from a non-secreting variant of a mouse plasmacytoma. It is widely used in biotechnology and pharmaceutical manu...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

NS0 on hiiren myeloomasolulinja, joka on peräisin hiiren plasmasytooman ei-erittävästä muunnoksesta. Sitä käytetään laajalti bioteknologiassa ja lääketeollisuudessa rekombinanttien monoklonaalisten vasta-aineiden ja muiden terapeuttisten proteiinien tuotannossa. NS0-solut soveltuvat suspensioviljelyyn, ja ne voivat kasvaa seerumittomissa, kemiallisesti määritellyissä väliaineissa, joten ne soveltuvat hyvin laajamittaiseen bioprosessointiin nykyisissä cGMP-olosuhteissa (current good manufacturing practice). Ne ovat tunnettuja korkeasta transfektiotehokkuudestaan ja kyvystään saavuttaa suuria proteiinien ilmentymistuottoja, erityisesti kun niitä käytetään yhdessä vahvojen nisäkäsperäisten ilmentymisvektoreiden ja monistusjärjestelmien, kuten metotreksaattivalintaan (MTX) perustuvien järjestelmien, kanssa.

Vaikka NS0-solut ovat hyödyllisiä proteiinien tuotannossa, ne ovat peräisin hiiristä, mikä tuo mukanaan joitakin rajoituksia, kuten ei-inhimilliset glykosylaatiomallit ekspressoiduissa proteiineissa. Nämä erot voivat vaikuttaa immunogeenisuuteen ja farmakokinetiikkaan, mikä on otettava huomioon kliinisissä sovelluksissa. NS0-peräiset tuotteet ovat kuitenkin saaneet viranomaishyväksynnän ja ovat kliinisessä käytössä, mikä korostaa linjan kestävyyttä ja skaalautuvuutta. NS0-solut eivät ole tuumorigeenisiä, eikä niillä ole endogeenista immunoglobuliini-ilmentymää, mikä vähentää natiivien vasta-ainesekvenssien kontaminaatioriskiä rekombinanttivasta-aineiden tuotantovaiheissa.

Kudos
Plasmasolumyelooma, hybridooman fuusiokumppani
Sairaus
Hiiren multippeli myelooma
Synonyymit
  • NSO
  • NS/0
  • NS/O
  • NS-0
  • P3-NS0
  • P3/NS0
  • P3/NSO

02Luokittelu

Organismi
Hiiri
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Jousitus
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Solutyyppi
Lymfoblastoidi

04Tunnisteet

Lähdeviite
NSO (Cytionin luettelonumero 400109)
NCBI-verotunnus
10090
Cellosaurus
CVCL_3940

05Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.