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MC3T3-E1
Tissue
Hueso, calota craneal
Synonyms
Mc3T3-E1, MC3T3E1, MC-3T3-E1, MC 3T3-E1

Documents

MC3T3-E1

Cell line · Product number 305187

MC3T3-E1 is a pre-osteoblastic cell line derived from the calvaria of a mouse embryo. These cells are extensively utilized in the study of osteogenesis, p...

US$395.00excl. tax and shipping
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Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

MC3T3-E1 es una línea celular preosteoblástica derivada de la calota craneal de un embrión de ratón. Estas células se utilizan ampliamente en el estudio de la osteogénesis, en particular para examinar los mecanismos moleculares y celulares que subyacen a la formación y diferenciación óseas. La línea celular MC3T3-E1 es conocida por su gran capacidad para diferenciarse en osteoblastos in vitro, un proceso que puede estimularse con ácido ascórbico y beta-glicerofosfato. Esta diferenciación se caracteriza por la expresión de marcadores osteogénicos clave, como la fosfatasa alcalina, la osteocalcina y el colágeno tipo I.

Las células MC3T3-E1 son fundamentales en la investigación centrada en la biología ósea, incluido el estudio de la deposición y mineralización de la matriz ósea. Estas células proporcionan un modelo confiable para investigar los efectos de diversos fármacos, hormonas y modificaciones genéticas sobre la función de los osteoblastos y la formación ósea. Además, la línea celular MC3T3-E1 es valiosa para estudiar afecciones patológicas como la osteoporosis y otras enfermedades relacionadas con los huesos. Su facilidad de cultivo y su respuesta bien caracterizada a los estímulos osteogénicos las convierten en la opción preferida para los investigadores que buscan desentrañar las complejidades de la fisiología y la patología óseas.

Tissue
Hueso, calota craneal
Applications
Diferenciación de osteoblastos in vitro
Synonyms
  • Mc3T3-E1
  • MC3T3E1
  • MC-3T3-E1
  • MC 3T3-E1

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Unspecified
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
De tipo fibroblástico
Cell type
Osteoblasto
Tumourigenic
Sí, en ratones inmunodeficientes
Doubling time
De 24 a 48 horas

04Identifiers

Citation
MC3T3-E1 (número de catálogo de Cytion 305187)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_0409

05Expression and susceptibility

Products
Colágeno

06Handling and culture

Culture medium
Alpha MEM, p/v: 2,0 mM de glutamina estable, p/v: ribonucleósidos, p/v: desoxirribonucleósidos, p/v: 1,0 mM de piruvato de sodio, p/v: 2,2 g/L de NaHCO₃, p/v: Ácido ascórbico (GIBCO, n.º de catálogo A1049001. No suministramos este producto; por favor, considere otros proveedores. Si necesita más ayuda, no dude en comunicárnoslo).
Incubation atmosphere

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

Supplements
Añade al medio un 10 % de FBS
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Retira el medio usado de las células adheridas y lávalas con PBS sin calcio ni magnesio. Para los frascos T25, usa de 3 a 5 ml de PBS, y para los frascos T75, usa de 5 a 10 ml. Luego, cubra las células por completo con Accutase, utilizando de 1 a 2 ml para los frascos T25 y 2,5 ml para los frascos T75. Deje que las células se incuben a temperatura ambiente durante 8 a 10 minutos para desprenderse. Después de la incubación, mezcla suavemente las células con 10 ml de medio para resuspendarlas; luego, centrifuga a 300xg durante 3 minutos. Deseche el sobrenadante, resuspenda las células en medio fresco y transfiéralas a frascos nuevos que ya contengan medio fresco.
Fluid renewal
De 2 a 3 veces por semana
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Freeze medium
Como medio de criopreservación, utilizamos un medio de crecimiento completo (que incluye FBS) + 10 % de DMSO para garantizar una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo de Cytion 800100), que incluye osmoprotectores y estabilizadores metabólicos optimizados para mejorar la recuperación y reducir el estrés inducido por la criopreservación.
Storage conditions

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Shipping conditions

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

08Donor

Breed / subspecies
C57BL/6
Donor age
1 día