Skip to content
MC3T3-E1
Tissue
กระดูก, กะโหลกศีรษะ
Synonyms
Mc3T3-E1, MC3T3E1, MC-3T3-E1, MC 3T3-E1

Documents

MC3T3-E1

Cell line · Product number 305187

MC3T3-E1 is a pre-osteoblastic cell line derived from the calvaria of a mouse embryo. These cells are extensively utilized in the study of osteogenesis, p...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

MC3T3-E1 เป็นเซลล์ไลน์ก่อนการสร้างกระดูก (pre-osteoblastic) ที่ได้มาจากกะโหลกศีรษะของตัวอ่อนหนู เซลล์เหล่านี้ถูกนำมาใช้อย่างกว้างขวางในการศึกษาการสร้างกระดูก (osteogenesis) โดยเฉพาะอย่างยิ่งในการตรวจสอบกลไกระดับโมเลกุลและเซลล์ที่เป็นพื้นฐานของการสร้างและการเปลี่ยนแปลงของกระดูกเซลล์ไลน์ MC3T3-E1 เป็นที่รู้จักกันดีในด้านความสามารถที่แข็งแกร่งในการเปลี่ยนแปลงเป็นเซลล์ออสทีโอบลาสต์ในหลอดทดลอง กระบวนการนี้สามารถกระตุ้นได้ด้วยกรดแอสคอร์บิกและเบต้า-กลีเซอโรฟอสเฟต การเปลี่ยนแปลงนี้สามารถสังเกตได้จาก การแสดงออกของตัวบ่งชี้ออสทีโอเจนิกที่สำคัญ เช่น อัลคาไลน์ฟอสฟาเตส, ออสทีโอแคลซิน, และคอลลาเจนชนิดที่ 1

เซลล์ MC3T3-E1 มีบทบาทสำคัญในการวิจัยที่มุ่งเน้นชีววิทยาของกระดูก รวมถึงการศึกษาการสะสมของเมทริกซ์กระดูกและการเกิดแร่ธาตุ เซลล์เหล่านี้เป็นแบบจำลองที่เชื่อถือได้สำหรับการศึกษาผลกระทบของยา ฮอร์โมน และการดัดแปลงทางพันธุกรรมต่างๆ ต่อการทำงานของเซลล์สร้างกระดูกและการสร้างกระดูกนอกจากนี้ สายเซลล์ MC3T3-E1 ยังมีคุณค่าในการศึกษาสภาวะทางพยาธิวิทยา เช่น โรคกระดูกพรุนและโรคที่เกี่ยวข้องกับกระดูกอื่น ๆ ความง่ายในการเพาะเลี้ยงและการตอบสนองที่ชัดเจนต่อสิ่งกระตุ้นการสร้างกระดูก ทำให้สายเซลล์นี้เป็นที่นิยมในหมู่นักวิจัยที่ต้องการไขความซับซ้อนของสรีรวิทยาและพยาธิสภาพของกระดูก

Tissue
กระดูก, กะโหลกศีรษะ
Applications
การแยกแยะเซลล์สร้างกระดูกในหลอดทดลอง
Synonyms
  • Mc3T3-E1
  • MC3T3E1
  • MC-3T3-E1
  • MC 3T3-E1

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Unspecified
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
คล้ายไฟโบรบลาสต์
Cell type
ออสทีโอบลาสต์
Tumourigenic
ใช่ ในหนูที่มีภาวะภูมิคุ้มกันบกพร่อง
Doubling time
24 ถึง 48 ชั่วโมง

04Identifiers

Citation
MC3T3-E1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305187)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_0409

05Expression and susceptibility

Products
คอลลาเจน

06Handling and culture

Culture medium
อัลฟา MEM, w: กลูตามีนเสถียร 2.0 มิลลิโมลาร์, w: ไรโบนิวคลีโอไซด์, w: เดซอกซีไรโบนิวคลีโอไซด์, w: โซเดียมไพรูเวต 1.0 มิลลิโมลาร์, w: 2.2 กรัม/ลิตร NaHCO3, w/o: กรดแอสคอร์บิก (GIBCO, หมายเลขแคตตาล็อก A1049001)เราไม่ได้จัดจำหน่ายสินค้าชิ้นนี้ กรุณาพิจารณาผู้จัดจำหน่ายรายอื่น หากท่านต้องการความช่วยเหลือเพิ่มเติม กรุณาแจ้งให้เราทราบ
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Breed / subspecies
C57BL/6
Donor age
1 วัน