Vai al contenuto
MC3T3-E1
Tessuto
Osso, calvario
Sinonimi
Mc3T3-E1, MC3T3E1, MC-3T3-E1, MC 3T3-E1

Documenti

MC3T3-E1

Cell line · Codice prodotto 305187

MC3T3-E1 is a pre-osteoblastic cell line derived from the calvaria of a mouse embryo. These cells are extensively utilized in the study of osteogenesis, p...

€430.00IVA e spese di spedizione escluse

Personalizzazione / Suggerimenti

Disponibile
Lotto
Consigliati (partita più recente)
  • CoA
1

01Informazioni generali

Descrizione

MC3T3-E1 è una linea cellulare pre-osteoblastica derivata dalla calvaria di un embrione di topo. Queste cellule sono ampiamente utilizzate nello studio dell'osteogenesi, in particolare per esaminare i meccanismi molecolari e cellulari alla base della formazione e del differenziamento osseo. La linea cellulare MC3T3-E1 è nota per la sua forte capacità di differenziarsi in osteoblasti in vitro, un processo che può essere stimolato dall'acido ascorbico e dal beta-glicerofosfato. Questa differenziazione è caratterizzata dall'espressione di marcatori osteogenici chiave, come la fosfatasi alcalina, l'osteocalcina e il collagene di tipo I.

Le cellule MC3T3-E1 sono fondamentali per la ricerca sulla biologia ossea, compreso lo studio della deposizione e della mineralizzazione della matrice ossea. Queste cellule costituiscono un modello affidabile per studiare gli effetti di vari farmaci, ormoni e modifiche genetiche sulla funzione degli osteoblasti e sulla formazione ossea. Inoltre, la linea cellulare MC3T3-E1 è preziosa per studiare condizioni patologiche come l'osteoporosi e altre malattie legate alle ossa. La facilità di coltura e la risposta ben caratterizzata agli stimoli osteogenici ne fanno una scelta privilegiata per i ricercatori che mirano a svelare le complessità della fisiologia e della patologia ossea.

Tessuto
Osso, calvario
Applicazioni
Differenziazione degli osteoblasti in vitro
Sinonimi
  • Mc3T3-E1
  • MC3T3E1
  • MC-3T3-E1
  • MC 3T3-E1

02Classificazione

Organismo
Mouse
Sesso
Non specificato
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Simile a un fibroblasto
Tipo di cellula
Osteoblasto
Tumorigenico
Sì, in topi immunodeficienti
Tempo di raddoppio
da 24 a 48 ore

04Identificatori

Riferimento bibliografico
MC3T3-E1 (catalogo Cytion numero 305187)
Codice fiscale NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0409

05Espressione e suscettibilità

Prodotti
Collagene

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
Alpha MEM, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: ribonucleosidi, w: desossiribonucleosidi, w: 1,0 mM di piruvato di sodio, w: 2,2 g/L di NaHCO3, w/o: Acido ascorbico (GIBCO, n. di catalogo A1049001. Non forniamo questo prodotto; si prega di prendere in considerazione altri fornitori. Se avete bisogno di ulteriore assistenza, fatecelo sapere)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Razza / sottospecie
C57BL/6
Età dei donatori
1 giorno