Preskoči na vsebino
MC3T3-E1
Tkivo
Kost, kalvarija
Sinonimi
Mc3T3-E1, MC3T3E1, MC-3T3-E1, MC 3T3-E1

Dokumenti

MC3T3-E1

Cell line · Številka izdelka 305187

MC3T3-E1 is a pre-osteoblastic cell line derived from the calvaria of a mouse embryo. These cells are extensively utilized in the study of osteogenesis, p...

€430.00brez davka in stroškov poštnine

Prilagajanje / Priporočila

Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

MC3T3-E1 je predosteoblastična celična linija, pridobljena iz kalvarije mišjega zarodka. Te celice se pogosto uporabljajo pri preučevanju osteogeneze, zlasti za preučevanje molekularnih in celičnih mehanizmov, ki so podlaga za nastanek in diferenciacijo kosti. Celična linija MC3T3-E1 je znana po močni sposobnosti diferenciacije v osteoblaste in vitro, ki jo je mogoče spodbuditi z askorbinsko kislino in beta-glicerofosfatom. Za to diferenciacijo je značilno izražanje ključnih osteogenih označevalcev, kot so alkalna fosfataza, osteokalcin in kolagen tipa I.

Celice MC3T3-E1 so koristne pri raziskavah, ki se osredotočajo na biologijo kosti, vključno s preučevanjem odlaganja kostnega matriksa in mineralizacije. Te celice so zanesljiv model za preučevanje učinkov različnih zdravil, hormonov in genetskih modifikacij na delovanje osteoblastov in tvorbo kosti. Poleg tega je celična linija MC3T3-E1 dragocena pri preučevanju patoloških stanj, kot so osteoporoza in druge bolezni, povezane s kostmi. Zaradi enostavnega gojenja in dobro opisanega odziva na osteogene dražljaje so najprimernejša izbira za raziskovalce, ki si prizadevajo razkriti zapletenost kostne fiziologije in patologije.

Tkivo
Kost, kalvarija
Uporaba
In vitro diferenciacija osteoblastov
Sinonimi
  • Mc3T3-E1
  • MC3T3E1
  • MC-3T3-E1
  • MC 3T3-E1

02Razvrstitev

Organizem
Miška
Seks
Ni navedeno
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Fibroblastom podobni
Vrsta celice
Osteoblast
Tumorigeničen
Da, pri imunsko pomanjkljivih miših
Čas podvojitve
24 do 48 ur

04Identifikatorji

Navajanje vira
MC3T3-E1 (kataloška številka Cytion 305187)
Davčna identifikacijska številka NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0409

05Izražanje in dovzetnost

Izdelki
Kolagen

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
Alpha MEM, w: 2,0 mM stabilnega glutamina, w: Ribonukleozidi, w: Deoksiribonukleozidi, w: 1,0 mM natrijevega piruvata, w: 2,2 g/L NaHCO3, w/o: Askorbinska kislina (GIBCO, kat. št. A1049001. Tega izdelka ne dobavljamo; prosimo, upoštevajte druge dobavitelje. Če potrebujete dodatno pomoč, nam to sporočite.)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Pasma / podvrsta
C57BL/6
Starost darovalca
1 dan