İçeriğe atla
MC3T3-E1
Doku
Kemik, kalvaryum
Eş anlamlılar
Mc3T3-E1, MC3T3E1, MC-3T3-E1, MC 3T3-E1

MC3T3-E1

Cell line · Ürün numarası 305187

MC3T3-E1 is a pre-osteoblastic cell line derived from the calvaria of a mouse embryo. These cells are extensively utilized in the study of osteogenesis, p...

€430.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

MC3T3-E1, fare embriyosunun kalvaryasından türetilen bir pre-osteoblastik hücre hattıdır. Bu hücreler, özellikle kemik oluşumu ve farklılaşmasının altında yatan moleküler ve hücresel mekanizmaları incelemek için osteogenez çalışmalarında yaygın olarak kullanılmaktadır. MC3T3-E1 hücre hattı, askorbik asit ve beta-gliserofosfat ile uyarılabilen bir süreç olan in vitro osteoblastlara farklılaşma konusundaki güçlü yeteneği ile bilinir. Bu farklılaşma, alkalin fosfataz, osteokalsin ve tip I kolajen gibi temel osteojenik belirteçlerin ekspresyonu ile işaretlenir.

MC3T3-E1 hücreleri, kemik matrisi birikimi ve mineralizasyon çalışması da dahil olmak üzere kemik biyolojisine odaklanan araştırmalarda etkilidir. Bu hücreler çeşitli ilaçların, hormonların ve genetik modifikasyonların osteoblast fonksiyonu ve kemik oluşumu üzerindeki etkilerini araştırmak için güvenilir bir model sağlar. Ayrıca MC3T3-E1 hücre hattı, osteoporoz ve kemikle ilgili diğer hastalıklar gibi patolojik durumların incelenmesinde de değerlidir. Kültür kolaylığı ve osteojenik uyaranlara iyi karakterize edilmiş yanıtları, onları kemik fizyolojisi ve patolojisinin karmaşıklıklarını çözmeyi amaçlayan araştırmacılar için tercih edilen bir seçenek haline getirmektedir.

Doku
Kemik, kalvaryum
Uygulamalar
In vitro osteoblast farklılaşması
Eş anlamlılar
  • Mc3T3-E1
  • MC3T3E1
  • MC-3T3-E1
  • MC 3T3-E1

02Sınıflandırma

Canlı
Fare
Cinsiyet
Belirtilmemiş
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Fibroblast benzeri
Hücre türü
Osteoblast
Tümör oluşturucu
Evet, bağışıklık sistemi yetersiz farelerde
İki katına çıkma süresi
24 ila 48 saat

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
MC3T3-E1 (Cytion katalog numarası 305187)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
10090
Cellosaurus
CVCL_0409

05İfade ve duyarlılık

Ürünler
Kolajen

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
Alfa MEM, w: 2.0 mM stabil Glutamin, w: Ribonükleozitler, w: Deoksiribonükleozitler, w: 1.0 mM Sodyum piruvat, w: 2.2g/L NaHCO3, w/o: Askorbik asit (GIBCO, Katalog No. A1049001. Bu ürünü tedarik etmiyoruz; lütfen diğer tedarikçileri değerlendirin. Daha fazla yardıma ihtiyacınız olursa lütfen bize bildirin)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Tür / alt tür
C57BL/6
Bağışçının yaşı
1 gün