Přejít na obsah
MC3T3-E1
Tkáň
Kosti, calvaria
Synonyma
Mc3T3-E1, MC3T3E1, MC-3T3-E1, MC 3T3-E1

Dokumenty

MC3T3-E1

Cell line · Číslo výrobku 305187

MC3T3-E1 is a pre-osteoblastic cell line derived from the calvaria of a mouse embryo. These cells are extensively utilized in the study of osteogenesis, p...

€430.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

MC3T3-E1 je preosteoblastická buněčná linie odvozená z kalvárie myšího embrya. Tyto buňky jsou hojně využívány při studiu osteogeneze, zejména pro zkoumání molekulárních a buněčných mechanismů, které jsou základem tvorby a diferenciace kostí. Buněčná linie MC3T3-E1 je známá svou silnou schopností diferencovat se v osteoblasty in vitro, přičemž tento proces lze stimulovat kyselinou askorbovou a beta-glycerofosfátem. Tato diferenciace se vyznačuje expresí klíčových osteogenních markerů, jako je alkalická fosfatáza, osteokalcin a kolagen typu I.

Buňky MC3T3-E1 mají zásadní význam ve výzkumu zaměřeném na biologii kostí, včetně studia ukládání kostní matrix a mineralizace. Tyto buňky poskytují spolehlivý model pro zkoumání účinků různých léčiv, hormonů a genetických modifikací na funkci osteoblastů a tvorbu kostí. Buněčná linie MC3T3-E1 je navíc cenná při studiu patologických stavů, jako je osteoporóza a další onemocnění související s kostmi. Jejich snadná kultivace a dobře charakterizovaná reakce na osteogenní podněty z nich činí preferovanou volbu pro výzkumné pracovníky, jejichž cílem je odhalit složitost kostní fyziologie a patologie.

Tkáň
Kosti, calvaria
Aplikace
Diferenciace osteoblastů in vitro
Synonyma
  • Mc3T3-E1
  • MC3T3E1
  • MC-3T3-E1
  • MC 3T3-E1

02Klasifikace

Organismus
Myš
Sex
Nespecifikováno
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Fibroblastům podobné
Typ buňky
Osteoblasty
Tumorogenní
Ano, u imunodeficitních myší
Doba zdvojnásobení
24 až 48 hodin

04Identifikátory

Citace
MC3T3-E1 (katalogové číslo Cytion 305187)
Daňové identifikační číslo NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0409

05Exprese a náchylnost

Produkty
Kolagen

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
Alpha MEM, w: 2,0 mM stabilní glutamin, w: ribonukleosidy, w: deoxyribonukleosidy, w: 1,0 mM pyruvát sodný, w: 2,2 g/l NaHCO3, w/o: Kyselina askorbová (GIBCO, katalogové číslo A1049001. Tento produkt nedodáváme; zvažte prosím jiné dodavatele. Pokud potřebujete další pomoc, dejte nám prosím vědět.)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Plemeno / poddruh
C57BL/6
Věk dárce
1 den