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MC3T3-E1
Gewebe
Knochen, Kalvarienberg
Synonyme
Mc3T3-E1, MC3T3E1, MC-3T3-E1, MC 3T3-E1

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MC3T3-E1

Cell line · Artikelnummer 305187

MC3T3-E1 is a pre-osteoblastic cell line derived from the calvaria of a mouse embryo. These cells are extensively utilized in the study of osteogenesis, p...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

MC3T3-E1 ist eine präosteoblastische Zelllinie, die aus der Calvaria eines Mausembryos gewonnen wird. Diese Zellen werden in großem Umfang für die Untersuchung der Osteogenese verwendet, insbesondere für die Untersuchung der molekularen und zellulären Mechanismen, die der Knochenbildung und -differenzierung zugrunde liegen. Die Zelllinie MC3T3-E1 ist bekannt für ihre robuste Fähigkeit, sich in vitro in Osteoblasten zu differenzieren, ein Prozess, der durch Ascorbinsäure und Beta-Glycerophosphat stimuliert werden kann. Diese Differenzierung ist durch die Expression wichtiger osteogener Marker wie alkalische Phosphatase, Osteocalcin und Typ-I-Kollagen gekennzeichnet.

MC3T3-E1-Zellen spielen eine wichtige Rolle in der Forschung im Bereich der Knochenbiologie, einschließlich der Untersuchung der Ablagerung von Knochenmatrix und Mineralisierung. Diese Zellen sind ein zuverlässiges Modell für die Untersuchung der Auswirkungen verschiedener Medikamente, Hormone und genetischer Veränderungen auf die Osteoblastenfunktion und die Knochenbildung. Darüber hinaus ist die MC3T3-E1-Zelllinie wertvoll für die Untersuchung pathologischer Zustände wie Osteoporose und anderer knochenbezogener Krankheiten. Ihre einfache Kultivierung und gut charakterisierte Reaktion auf osteogene Stimuli machen sie zu einer bevorzugten Wahl für Forscher, die die Komplexität der Knochenphysiologie und -pathologie entschlüsseln wollen.

Gewebe
Knochen, Kalvarienberg
Anwendungen
In vitro-Differenzierung von Osteoblasten
Synonyme
  • Mc3T3-E1
  • MC3T3E1
  • MC-3T3-E1
  • MC 3T3-E1

02Klassifizierung

Organismus
Maus
Sex
Nicht näher bezeichnet
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Fibroblastenähnlich
Zelltyp
Osteoblasten
Tumorauslösend
Ja, bei immundefizienten Mäusen
Verdopplungszeit
24 bis 48 Stunden

04Bezeichner

Quellenangabe
MC3T3-E1 (Cytion Katalognummer 305187)
NCBI-Steuer-ID
10090
Cellosaurus
CVCL_0409

05Expression und Anfälligkeit

Produkte
Kollagen

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
Alpha MEM, w: 2,0 mM stabiles Glutamin, w: Ribonukleoside, w: Deoxyribonukleoside, w: 1,0 mM Natriumpyruvat, w: 2,2g/L NaHCO3, w/o: Ascorbinsäure (GIBCO, Katalog-Nr. A1049001. Wir liefern dieses Produkt nicht; bitte beachten Sie andere Anbieter. Bitte lassen Sie uns wissen, wenn Sie weitere Unterstützung benötigen)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Rasse / Unterart
C57BL/6
Alter des Spenders
1 Tag