MC3T3-E1
Cell line · Product number 305187
MC3T3-E1 is a pre-osteoblastic cell line derived from the calvaria of a mouse embryo. These cells are extensively utilized in the study of osteogenesis, p...
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01General information
- Description
MC3T3-E1 是一種源自小鼠胚胎顱頂骨的成骨前細胞系。這些細胞廣泛應用於成骨研究,特別是用於探究骨形成與分化背後的分子及細胞機制。 MC3T3-E1 細胞系以其在體外分化為成骨細胞的強大能力而聞名,此分化過程可透過抗壞血酸和 β-甘油磷酸鹽加以刺激。此分化過程的特徵在於會表達關鍵的成骨標記物,例如鹼性磷酸酶、骨鈣素及第一型膠原蛋白。
MC3T3-E1 細胞在以骨生物學為重點的研究中扮演關鍵角色,包括骨基質沉積與礦化過程的研究。這些細胞為探究各種藥物、荷爾蒙及基因改造對成骨細胞功能與骨形成的影響,提供了可靠的模型。 此外,MC3T3-E1 細胞系在研究骨質疏鬆症及其他骨骼相關疾病等病理狀況方面亦極具價值。其培養簡便且對成骨刺激的反應特徵明確,使其成為致力於釐清骨骼生理學與病理學複雜性的研究人員的首選。
- Tissue
- 骨骼,顱頂骨
- Applications
- 體外成骨細胞分化
- Synonyms
- Mc3T3-E1
- MC3T3E1
- MC-3T3-E1
- MC 3T3-E1
02Classification
- Organism
- Mouse
- Sex
- Unspecified
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- 成纖維細胞樣
- Cell type
- 成骨細胞
- Tumourigenic
- 是的,在免疫缺陷小鼠中
- Doubling time
- 24 至 48 小時
04Identifiers
- Citation
- MC3T3-E1(Cytion 型號 305187)
- NCBI TaxID
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_0409
05Expression and susceptibility
- Products
- 膠原蛋白
06Handling and culture
- Culture medium
- Alpha MEM,含:2.0 mM 穩定谷氨醯胺,含:核苷,含:脫氧核苷,含:1.0 mM 丙酮酸鈉,含:2.2 g/L NaHCO₃,不含: 抗壞血酸(GIBCO,型號 A1049001。本公司不供應此產品;請考慮其他供應商。如需進一步協助,請告知我們。)
- Incubation atmosphere
37°C,5% CO₂,加濕環境。
- Supplements
- 在培養基中加入 10% 的胎牛血清(FBS)
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- 從貼壁細胞中移除舊培養基,並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS,T75培養瓶則使用5-10毫升。 接著,用 Accutase 完全覆蓋細胞,T25 培養瓶使用 1–2 毫升,T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘,使其脫附。 孵育後,將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮,然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液,將細胞重新懸浮於新鮮培養基中,並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。
- Fluid renewal
- 每週 2 至 3 次
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法,排除支原體污染的可能性。
為確保無細菌、真菌或酵母菌污染,每日均會對細胞培養物進行目視檢查。
- Freeze medium
- 作為冷凍保存培養基,我們使用完全生長培養基(含 FBS)+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率,或使用 CM-1 (Cytion 型號 800100),該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑,可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
- Storage conditions
若需長期保存,請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前,可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中,作為短期過渡步驟。
- Shipping conditions
冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏,並裝於經驗證的隔熱包裝中,包裝內含有足夠的冷媒,以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後,請立即檢查容器,並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。
08Donor
- Breed / subspecies
- C57BL/6
- Donor age
- 1 天
09Legal and safety
- Safety precautions
- 若計劃將低溫試管存放在液態氮中以供日後解凍,必須嚴格遵守相關安全措施。 必須穿戴適當的防護手套和防護服,且在將冷凍樣本移入或移出液氮罐時,必須佩戴口罩或安全護目鏡。此舉旨在降低因取出時冷凍試管可能發生爆炸而導致受傷的風險,此類爆炸可能造成尖銳碎片飛濺。
- Warranty
在 Cytion,我們對產品的品質與存活率提供保障。 我們保證,自本公司設施出貨後 60 天內,我們的細胞在培養開始時仍具存活能力。 我們保證所有材料均符合 分析證明書及/或產品說明書中所載的規格。
詳情請參閱我們的 《保固聲明》。
- Material Transfer Agreement required
- Yes
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