Mine otse sisu juurde
MC3T3-E1
Kude
Luu, vasikate
Sünonüümid
Mc3T3-E1, MC3T3E1, MC-3T3-E1, MC 3T3-E1

Dokumendid

MC3T3-E1

Cell line · Toote number 305187

MC3T3-E1 is a pre-osteoblastic cell line derived from the calvaria of a mouse embryo. These cells are extensively utilized in the study of osteogenesis, p...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Kohandamine / Soovitused

Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

MC3T3-E1 on hiirte embrüo vasikaliidist saadud eelosteoblastiline rakuliin. Neid rakke kasutatakse laialdaselt osteogeneesi uurimisel, eelkõige luu moodustumise ja diferentseerumise aluseks olevate molekulaar- ja rakumehhanismide uurimiseks. MC3T3-E1 rakuliin on tuntud oma tugeva võime poolest diferentseeruda in vitro osteoblastideks, mida saab stimuleerida askorbiinhappe ja beetaglütserofosfaadiga. Seda diferentseerumist iseloomustab peamiste osteogeensete markerite, nagu leeliseline fosfataas, osteokaltsiin ja I tüüpi kollageen, ekspressioon.

MC3T3-E1 rakud on olulised luubioloogiale keskenduvates uuringutes, sealhulgas luumatrixi ladestumise ja mineraliseerumise uurimisel. Need rakud pakuvad usaldusväärset mudelit erinevate ravimite, hormoonide ja geneetiliste modifikatsioonide mõju uurimiseks osteoblastide funktsioonile ja luumoodustusele. Lisaks on MC3T3-E1 rakuliin väärtuslik patoloogiliste seisundite, nagu osteoporoos ja muud luuga seotud haigused, uurimisel. Nende lihtne kasvatamine ja hästi iseloomustatud reaktsioon osteogeensetele stiimulitele teevad neist eelistatud valiku teadlastele, kelle eesmärk on avastada luu füsioloogia ja patoloogia keerukust.

Kude
Luu, vasikate
Rakendused
In vitro osteoblastide diferentseerimine
Sünonüümid
  • Mc3T3-E1
  • MC3T3E1
  • MC-3T3-E1
  • MC 3T3-E1

02Klassifikatsioon

Organism
Hiir
Sugu
Määratlemata
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Fibroblastilaadsed
Rakutüüp
Osteoblastid
Tuumorigeenne
Jah, immuunpuudulikkusega hiirtel
Kahekordistumisaeg
24 kuni 48 tundi

04Tunnused

Viide
MC3T3-E1 (Cytioni katalooginumber 305187)
NCBI maksukood
10090
Cellosaurus
CVCL_0409

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Tooted
Kollageen

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
Alpha MEM, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: ribonukleosiidid, w: desoksüribonukleosiidid, w: 1,0 mM naatriumpüruvaat, w: 2,2g/L NaHCO3, w/o: Askorbiinhape (GIBCO, kataloogi nr A1049001. Me ei tarni seda toodet; palun kaaluge teisi tarnijaid. Palun andke meile teada, kui vajate täiendavat abi)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Tõug / alamliik
C57BL/6
Doonori vanus
1 päev