Siirry sisältöön
MC3T3-E1
Kudos
Luu, calvaria
Synonyymit
Mc3T3-E1, MC3T3E1, MC-3T3-E1, MC 3T3-E1

Asiakirjat

MC3T3-E1

Cell line · Tuotenumero 305187

MC3T3-E1 is a pre-osteoblastic cell line derived from the calvaria of a mouse embryo. These cells are extensively utilized in the study of osteogenesis, p...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja

Räätälöinti / Suositukset

Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

MC3T3-E1 on hiiren alkion calvariasta peräisin oleva pre-osteoblastinen solulinja. Näitä soluja hyödynnetään laajasti osteogeneesin tutkimuksessa, erityisesti luun muodostumisen ja erilaistumisen taustalla olevien molekyyli- ja solumekanismien tutkimisessa. MC3T3-E1-solulinja tunnetaan vahvasta kyvystään erilaistua osteoblasteiksi in vitro, ja tätä prosessia voidaan stimuloida askorbiinihapolla ja beetaglyserofosfaatilla. Tämä erilaistuminen näkyy keskeisten osteogeenisten merkkiaineiden, kuten alkalisen fosfataasin, osteokalsiinin ja tyypin I kollageenin, ilmentymisenä.

MC3T3-E1-solut ovat tärkeitä luubiologiaan keskittyvässä tutkimuksessa, mukaan lukien luun matriksin laskeutumisen ja mineralisaation tutkimus. Nämä solut tarjoavat luotettavan mallin erilaisten lääkkeiden, hormonien ja geneettisten muutosten vaikutusten tutkimiseen osteoblastien toimintaan ja luun muodostumiseen. Lisäksi MC3T3-E1-solulinja on arvokas tutkittaessa patologisia tiloja, kuten osteoporoosia ja muita luustoon liittyviä sairauksia. Niiden helppo viljeltävyys ja hyvin karakterisoitu vaste osteogeenisille ärsykkeille tekevät niistä ensisijaisen valinnan tutkijoille, jotka pyrkivät selvittämään luun fysiologian ja patologian monimutkaisuutta.

Kudos
Luu, calvaria
Sovellukset
In vitro osteoblastien erilaistuminen
Synonyymit
  • Mc3T3-E1
  • MC3T3E1
  • MC-3T3-E1
  • MC 3T3-E1

02Luokittelu

Organismi
Hiiri
Sukupuoli
Määrittelemätön
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Fibroblastien kaltaiset
Solutyyppi
Osteoblastit
Kasvaimia aiheuttava
Kyllä, immuunipuutteisilla hiirillä
Kaksinkertaistumisaika
24-48 tuntia

04Tunnisteet

Lähdeviite
MC3T3-E1 (Cytionin luettelonumero 305187)
NCBI-verotunnus
10090
Cellosaurus
CVCL_0409

05Ilmentyminen ja alttius

Tuotteet
Kollageeni

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
Alpha MEM, w: 2,0 mM stabiili glutamiini, w: ribonukleosidit, w: deoksiribonukleosidit, w: 1,0 mM natriumpyruvaatti, w: 2,2 g/l NaHCO3, w/o: Askorbiinihappo (GIBCO, luettelo nro A1049001. Emme toimita tätä tuotetta; harkitkaa muita toimittajia. Ilmoittakaa meille, jos tarvitsette lisäapua)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Rotua / alalajia
C57BL/6
Luovuttajan ikä
1 päivä