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MC3T3-E1
Tecido
Osso, calvária
Sinónimos
Mc3T3-E1, MC3T3E1, MC-3T3-E1, MC 3T3-E1

Documentos

MC3T3-E1

Cell line · Número do produto 305187

MC3T3-E1 is a pre-osteoblastic cell line derived from the calvaria of a mouse embryo. These cells are extensively utilized in the study of osteogenesis, p...

€430.00sem impostos nem portes de envio

Personalização / Recomendações

Em stock
Lote
Recomendado (lote mais recente)
  • CoA
1

01Informações gerais

Descrição

MC3T3-E1 é uma linha celular pré-osteoblástica derivada da calvária de um embrião de rato. Estas células são amplamente utilizadas no estudo da osteogénese, particularmente para examinar os mecanismos moleculares e celulares subjacentes à formação e diferenciação óssea. A linha celular MC3T3-E1 é conhecida pela sua capacidade robusta de se diferenciar em osteoblastos in vitro, um processo que pode ser estimulado por ácido ascórbico e beta-glicerofosfato. Esta diferenciação é marcada pela expressão de marcadores osteogénicos essenciais, como a fosfatase alcalina, a osteocalcina e o colagénio de tipo I.

As células MC3T3-E1 são fundamentais na investigação centrada na biologia óssea, incluindo o estudo da deposição e mineralização da matriz óssea. Estas células constituem um modelo fiável para investigar os efeitos de vários fármacos, hormonas e modificações genéticas na função dos osteoblastos e na formação óssea. Além disso, a linha celular MC3T3-E1 é valiosa no estudo de condições patológicas como a osteoporose e outras doenças relacionadas com os ossos. A facilidade de cultura e a resposta bem caracterizada aos estímulos osteogénicos fazem delas a escolha preferida dos investigadores que pretendem desvendar as complexidades da fisiologia e patologia ósseas.

Tecido
Osso, calvária
Aplicações
Diferenciação de osteoblastos in vitro
Sinónimos
  • Mc3T3-E1
  • MC3T3E1
  • MC-3T3-E1
  • MC 3T3-E1

02Classificação

Organismo
Rato
Sexo
Não especificado
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Tipo fibroblastos
Tipo de célula
Osteoblastos
Tumorigénico
Sim, em ratos imunodeficientes
Tempo de duplicação
24 a 48 horas

04Identificadores

Referência
MC3T3-E1 (número de catálogo Cytion 305187)
Número de identificação fiscal do NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0409

05Expressão e suscetibilidade

Produtos
Colagénio

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
MEM alfa, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: Ribonucleósidos, com: Desoxirribonucleósidos, com: 1,0 mM de piruvato de sódio, com: 2,2g/L NaHCO3, sem: Ácido ascórbico (GIBCO, N.º de catálogo A1049001. Não fornecemos este produto; considere outros fornecedores. Por favor, informe-nos se precisar de mais assistência)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Raça / subespécie
C57BL/6
Idade do dador
1 dia