Prejsť na obsah
MC3T3-E1
Tkanivo
Kosť, kalvária
Synonymá
Mc3T3-E1, MC3T3E1, MC-3T3-E1, MC 3T3-E1

Dokumenty

MC3T3-E1

Cell line · Číslo výrobku 305187

MC3T3-E1 is a pre-osteoblastic cell line derived from the calvaria of a mouse embryo. These cells are extensively utilized in the study of osteogenesis, p...

€430.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

MC3T3-E1 je predosteoblastická bunková línia odvodená z kalvárie myšieho embrya. Tieto bunky sa vo veľkej miere využívajú pri štúdiu osteogenézy, najmä na skúmanie molekulárnych a bunkových mechanizmov, ktoré sú základom tvorby a diferenciácie kostí. Bunková línia MC3T3-E1 je známa svojou silnou schopnosťou diferencovať sa na osteoblasty in vitro, pričom tento proces možno stimulovať kyselinou askorbovou a beta-glycerofosfátom. Táto diferenciácia sa vyznačuje expresiou kľúčových osteogénnych markerov, ako sú alkalická fosfatáza, osteokalcín a kolagén typu I.

Bunky MC3T3-E1 sú dôležité vo výskume zameranom na biológiu kostí vrátane štúdia ukladania kostnej matrix a mineralizácie. Tieto bunky poskytujú spoľahlivý model na skúmanie účinkov rôznych liekov, hormónov a genetických modifikácií na funkciu osteoblastov a tvorbu kostí. Okrem toho je bunková línia MC3T3-E1 cenná pri štúdiu patologických stavov, ako je osteoporóza a iné ochorenia súvisiace s kosťami. Ich jednoduchá kultivácia a dobre charakterizovaná reakcia na osteogénne podnety z nich robia preferovanú voľbu pre výskumníkov, ktorých cieľom je odhaliť zložitosť fyziológie a patológie kostí.

Tkanivo
Kosť, kalvária
Aplikácie
In vitro diferenciácia osteoblastov
Synonymá
  • Mc3T3-E1
  • MC3T3E1
  • MC-3T3-E1
  • MC 3T3-E1

02Klasifikácia

Organizmus
Myš
Sex
Nešpecifikované
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Fibroblastom podobné
Typ bunky
Osteoblasty
Tumorigenický
Áno, u imunodeficientných myší
Doba zdvojnásobenia
24 až 48 hodín

04Identifikátory

Citácia
MC3T3-E1 (katalógové číslo Cytion 305187)
Daňové identifikačné číslo NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0409

05Prejav a náchylnosť

Produkty
Kolagén

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
Alfa MEM, w: 2,0 mM stabilný glutamín, w: Ribonukleozidy, w: Deoxyribonukleozidy, w: 1,0 mM pyruvát sodný, w: 2,2 g/L NaHCO3, w/o: Kyselina askorbová (GIBCO, katalógové číslo A1049001. Tento výrobok nedodávame; zvážte prosím iných dodávateľov. Ak potrebujete ďalšiu pomoc, dajte nám prosím vedieť.)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Plemeno / poddruh
C57BL/6
Vek darcu
1 deň