Pereiti prie turinio
MC3T3-E1
Audinys
Kaulas, kalvarija
Sinonimai
Mc3T3-E1, MC3T3E1, MC-3T3-E1, MC 3T3-E1

Dokumentai

MC3T3-E1

Cell line · Prekės numeris 305187

MC3T3-E1 is a pre-osteoblastic cell line derived from the calvaria of a mouse embryo. These cells are extensively utilized in the study of osteogenesis, p...

€430.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

MC3T3-E1 yra preosteoblastinių ląstelių linija, gauta iš pelės embriono kalvarijų. Šios ląstelės plačiai naudojamos osteogenezei tirti, ypač tiriant molekulinius ir ląstelinius kaulų formavimosi ir diferenciacijos mechanizmus. MC3T3-E1 ląstelių linija pasižymi dideliu gebėjimu in vitro diferencijuotis į osteoblastus, o šį procesą galima skatinti askorbo rūgštimi ir beta-glicerofosfatu. Diferenciacija pasižymi pagrindinių osteogeninių žymenų, tokių kaip šarminė fosfatazė, osteokalcinas ir I tipo kolagenas, raiška.

MC3T3-E1 ląstelės yra labai svarbios atliekant kaulų biologijos tyrimus, įskaitant kaulinio matrikso nusėdimo ir mineralizacijos tyrimus. Šios ląstelės yra patikimas modelis tiriant įvairių vaistų, hormonų ir genetinių modifikacijų poveikį osteoblastų funkcijai ir kaulų formavimuisi. Be to, MC3T3-E1 ląstelių linija vertinga tiriant patologines būkles, pavyzdžiui, osteoporozę ir kitas su kaulais susijusias ligas. Dėl lengvo kultivavimo ir gerai apibūdinto atsako į osteogeninius dirgiklius jas renkasi tyrėjai, siekiantys išsiaiškinti sudėtingą kaulų fiziologiją ir patologiją.

Audinys
Kaulas, kalvarija
Paraiškos
Osteoblastų diferenciacija in vitro
Sinonimai
  • Mc3T3-E1
  • MC3T3E1
  • MC-3T3-E1
  • MC 3T3-E1

02Klasifikacija

Organizmas
Pele
Seksas
Nenurodyta
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Į fibroblastus panašus
Ląstelių tipas
Osteoblastai
Tumorogeninis
Taip, su imunodeficitinėmis pelėmis
Laikas, per kurį skaičius padvigubėja
24-48 valandos

04Identifikatoriai

Nuoroda
MC3T3-E1 (Cytion katalogo numeris 305187)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
10090
Cellosaurus
CVCL_0409

05Išraiška ir jautrumas

Produktai
Kolagenas

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
Alfa MEM, w: 2,0 mM stabilus glutaminas, w: Ribonukleozidai, w: Deoksiribonukleozidai, w: 1,0 mM natrio piruvatas, w: 2,2 g/L NaHCO3, w/o: Askorbo rūgštis (GIBCO, katalogo Nr. Šio produkto netiekiame; prašome apsvarstyti kitų tiekėjų galimybes. Praneškite mums, jei reikia papildomos pagalbos.)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Veislė / porūšis
C57BL/6
Donoro amžius
1 diena