Skip to content
MC3T3-E1
Tissue
Xương, vòm sọ
Synonyms
Mc3T3-E1, MC3T3E1, MC-3T3-E1, MC 3T3-E1

Documents

MC3T3-E1

Cell line · Product number 305187

MC3T3-E1 is a pre-osteoblastic cell line derived from the calvaria of a mouse embryo. These cells are extensively utilized in the study of osteogenesis, p...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

MC3T3-E1 là dòng tế bào tiền osteoblast được phân lập từ xương sọ của phôi chuột. Các tế bào này được sử dụng rộng rãi trong nghiên cứu về quá trình tạo xương, đặc biệt là để nghiên cứu các cơ chế phân tử và tế bào cơ bản của quá trình hình thành và biệt hóa xương. Dòng tế bào MC3T3-E1 nổi tiếng với khả năng biệt hóa mạnh mẽ thành tế bào tạo xương (osteoblast) trong điều kiện nuôi cấy in vitro, quá trình này có thể được kích thích bởi axit ascorbic và beta-glycerophosphate. Quá trình biệt hóa này được đặc trưng bởi sự biểu hiện của các dấu hiệu osteogenic quan trọng như phosphatase kiềm, osteocalcin và collagen loại I.

Tế bào MC3T3-E1 đóng vai trò quan trọng trong nghiên cứu về sinh học xương, bao gồm việc nghiên cứu quá trình lắng đọng ma trận xương và khoáng hóa. Các tế bào này cung cấp một mô hình đáng tin cậy để nghiên cứu tác động của các loại thuốc, hormone và biến đổi gen đối với chức năng của tế bào tạo xương và quá trình hình thành xương. Ngoài ra, dòng tế bào MC3T3-E1 còn có giá trị trong việc nghiên cứu các tình trạng bệnh lý như loãng xương và các bệnh liên quan đến xương khác. Khả năng nuôi cấy dễ dàng và phản ứng được đặc trưng rõ ràng đối với các kích thích tạo xương khiến chúng trở thành lựa chọn ưu tiên cho các nhà nghiên cứu mong muốn làm sáng tỏ các phức tạp của sinh lý và bệnh lý xương.

Tissue
Xương, vòm sọ
Applications
Sự biệt hóa của tế bào tạo xương trong ống nghiệm
Synonyms
  • Mc3T3-E1
  • MC3T3E1
  • MC-3T3-E1
  • MC 3T3-E1

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Unspecified
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Tế bào giống fibroblast
Cell type
Tế bào tạo xương
Tumourigenic
Đúng, ở chuột bị suy giảm miễn dịch
Doubling time
24 đến 48 giờ

04Identifiers

Citation
MC3T3-E1 (Số catalog Cytion 305187)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_0409

05Expression and susceptibility

Products
Collagen

06Handling and culture

Culture medium
Alpha MEM, w: 2,0 mM glutamine ổn định, w: ribonucleosides, w: deoxyribonucleosides, w: 1,0 mM natri pyruvate, w: 2,2 g/L NaHCO₃, w/o: axit ascorbic (GIBCO, Số catalog A1049001. Chúng tôi không cung cấp sản phẩm này; vui lòng xem xét các nhà cung cấp khác. Vui lòng cho chúng tôi biết nếu bạn cần hỗ trợ thêm.)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung 10% huyết thanh bò phôi (FBS) vào môi trường nuôi cấy
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Loại bỏ môi trường nuôi cấy cũ khỏi các tế bào bám dính và rửa chúng bằng PBS không chứa canxi và magiê. Đối với bình T25, sử dụng 3-5 ml PBS, và đối với bình T75, sử dụng 5-10 ml. Sau đó, phủ hoàn toàn các tế bào bằng Accutase, sử dụng 1-2 ml cho bình T25 và 2,5 ml cho bình T75. Để tế bào ủ ở nhiệt độ phòng trong 8-10 phút để tách chúng ra. Sau khi ủ, nhẹ nhàng trộn tế bào với 10 ml môi trường để tái phân tán chúng, sau đó ly tâm ở 300xg trong 3 phút. Loại bỏ dịch trên, tái phân tán tế bào trong môi trường tươi và chuyển chúng vào các bình mới đã chứa môi trường tươi.
Fluid renewal
2 đến 3 lần mỗi tuần
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Freeze medium
Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

08Donor

Breed / subspecies
C57BL/6
Donor age
1 ngày