
- Tissue
- Cerveau, cortex cérébral
- Disease
- Endothéliome
- Synonyms
- bEND.3, b.End3, bEnd.3, bEnd3, BEND3, brain-derived Endothelial cells.3
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Bend.3
Cell line · Product number 305265
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01General information
- Description
La lignée cellulaire Bend.3 est dérivée de cellules endothéliales du cerveau de souris et est largement utilisée dans la recherche neurovasculaire. Ces cellules servent de modèle pour l’étude de la barrière hémato-encéphalique (BHE), une structure essentielle qui régule le passage des substances de la circulation sanguine vers le cerveau. Les cellules Bend.3 jouent un rôle déterminant dans l’étude des mécanismes moléculaires et cellulaires qui régissent l’intégrité, la perméabilité et les fonctions de transport de la BHE. Les chercheurs utilisent les cellules Bend.3 pour étudier la physiopathologie de divers troubles neurologiques, tels que l’AVC, la maladie d’Alzheimer et la sclérose en plaques, pour lesquels un dysfonctionnement de la BHE est caractéristique.
Les cellules Bend.3 présentent des caractéristiques endothéliales, notamment l’expression de protéines des jonctions serrées telles que l’occludine, les claudines et la zonula occludens-1 (ZO-1), qui sont essentielles au maintien de la perméabilité sélective de la BHE. Elles expriment également des marqueurs tels que le CD31 et le facteur von Willebrand, typiques des cellules endothéliales. Les cellules Bend.3 réagissent aux stimuli inflammatoires et au stress oxydatif, ce qui les rend adaptées aux études sur la perturbation de la BHE et la neuroinflammation. De plus, cette lignée cellulaire est utilisée pour évaluer l’efficacité et l’innocuité d’agents pharmacologiques destinés à traverser la BHE, contribuant ainsi au développement de traitements pour les troubles du système nerveux central. L’utilité des cellules Bend.3 dans la modélisation de l’unité neurovasculaire souligne leur importance pour faire progresser notre compréhension de la biologie des cellules endothéliales cérébrales et le développement de neurothérapies.
- Tissue
- Cerveau, cortex cérébral
- Disease
- Endothéliome
- Synonyms
- bEND.3
- b.End3
- bEnd.3
- bEnd3
- BEND3
- brain-derived Endothelial cells.3
02Classification
- Organism
- Mouse
- Sex
- Unspecified
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- GMO-S1
- GMO status details
- GMO-S1: This murine endothelial cell line (bEnd.3) contains a polyomavirus middle T antigen encoded by the NTKmT retroviral vector, driving transformation and enhanced proliferation. The construct is stably present in brain microvascular endothelial cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- Endothélial
- Cell type
- Cellule endothéliale
04Identifiers
- Citation
- Bend.3 (numéro de catalogue Cytion 305265)
- NCBI TaxID
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_0170
05Expression and susceptibility
- Antigen expression
- ICAM-1+, VCAM-1+, MAdCAM-1+
- Viruses
- Transformant : Antigène T intermédiaire du polyomavirus murin (souche A2) (MPyV) (PyMT)
06Handling and culture
- Culture medium
- DMEM, p/v : 4,5 g/L de glucose, p/v : 4 mM de L-glutamine, p/v : 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v : 1,0 mM de pyruvate de sodium (référence Cytion 820300a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.
- Supplements
- Ajouter 10 % de FBS au milieu de culture
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Retirez l’ancien milieu des cellules adhérentes et lavez-les avec du PBS sans calcium ni magnésium. Pour les flacons T25, utilisez 3 à 5 ml de PBS, et pour les flacons T75, utilisez 5 à 10 ml. Ensuite, recouvrez complètement les cellules d’Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 8 à 10 minutes afin de les détacher. Après l’incubation, mélangez délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifugez à 300 x g pendant 3 minutes. Éliminez le surnageant, remettez les cellules en suspension dans du milieu frais, puis transférez-les dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.
Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.
- Freeze medium
- Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation.
- Storage conditions
Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.
- Shipping conditions
Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.
08Donor
- Breed / subspecies
- BALB/c
- Donor age
- 6 semaines
09Legal and safety
- Safety precautions
- Lorsqu’on prévoit entreposer un cryotube dans de l’azote liquide en vue d’une décongélation ultérieure, il est impératif de respecter des mesures de sécurité rigoureuses. Le port de gants et de vêtements de protection appropriés est essentiel, et l’utilisation d’un masque facial ou de lunettes de protection est obligatoire lors du transfert d’échantillons congelés vers ou depuis le réservoir d’azote liquide. Cette précaution vise à réduire le risque de blessure causé par d’éventuelles explosions de cryotubes lors de leur retrait, pouvant entraîner la projection de fragments coupants.
- Warranty
Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.
Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.
- Material Transfer Agreement required
- Yes
10Product details
- Composition table