İçeriğe atla
Bend.3
Doku
Beyin, serebral korteks
Hastalık
Endotelyoma
Eş anlamlılar
bEND.3, b.End3, bEnd.3, bEnd3, BEND3, brain-derived Endothelial cells.3

Bend.3

Cell line · Ürün numarası 305265

€430.00vergi ve kargo hariç
Sipariş üzerine üretilir
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

Bend.3 hücre hattı fare beyin endotel hücrelerinden türetilmiştir ve nörovasküler araştırmalarda yaygın olarak kullanılmaktadır. Bu hücreler, maddelerin kan dolaşımından beyne geçişini düzenleyen kritik bir yapı olan kan-beyin bariyerini (BBB) incelemek için bir model görevi görür. Bend.3 hücreleri, BBB bütünlüğünü, geçirgenliğini ve taşıma işlevlerini yöneten moleküler ve hücresel mekanizmaları keşfetmede etkilidir. Araştırmacılar Bend.3 hücrelerini, BBB disfonksiyonunun ayırt edici bir özellik olduğu inme, Alzheimer hastalığı ve multipl skleroz gibi çeşitli nörolojik bozuklukların patofizyolojisini araştırmak için kullanmaktadır.

Bend.3 hücreleri, BBB'nin seçici geçirgenliğini korumak için gerekli olan occludin, claudins ve zonula occludens-1 (ZO-1) gibi sıkı bağlantı proteinlerinin ekspresyonu da dahil olmak üzere endotelyal özellikler sergiler. Ayrıca endotel hücreleri için tipik olan CD31 ve von Willebrand faktörü gibi belirteçleri de ifade ederler. Bend.3 hücreleri enflamatuar uyaranlara ve oksidatif strese yanıt verir, bu da onları BBB bozulması ve nöroenflamasyon üzerine çalışmalar için uygun hale getirir. Ayrıca, bu hücre hattı, BBB'yi geçmesi amaçlanan farmakolojik ajanların etkinliğini ve güvenliğini değerlendirmek için kullanılır ve merkezi sinir sistemi bozuklukları için tedavilerin geliştirilmesine yardımcı olur. Bend.3 hücrelerinin nörovasküler ünitenin modellenmesindeki faydası, beyin endotel hücre biyolojisi ve nöroterapötiklerin geliştirilmesi konusundaki anlayışımızı ilerletmedeki öneminin altını çizmektedir.

Doku
Beyin, serebral korteks
Hastalık
Endotelyoma
Eş anlamlılar
  • bEND.3
  • b.End3
  • bEnd.3
  • bEnd3
  • BEND3
  • brain-derived Endothelial cells.3

02Sınıflandırma

Canlı
Fare
Cinsiyet
Belirtilmemiş
Büyüme özellikleri
Bağlı
GDO durumu
GMO-S1
GDO durumuna ilişkin ayrıntılar
GMO-S1: This murine endothelial cell line (bEnd.3) contains a polyomavirus middle T antigen encoded by the NTKmT retroviral vector, driving transformation and enhanced proliferation. The construct is stably present in brain microvascular endothelial cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Endotelyal
Hücre türü
Endotel hücre

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
Bend.3 (Cytion katalog numarası 305265)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
10090
Cellosaurus
CVCL_0170

05İfade ve duyarlılık

Antijen ekspresyonu
ICAM-1 +, VCAM-1 +, MAdCAM-1 +
Virüsler
Transformant: Murin poliomavirüs (A2 suşu) (MPyV) orta T antijeni (PyMT)

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
DMEM, w: 4,5 g/L Glukoz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Sodyum piruvat (Cytion ürün numarası 820300a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Tür / alt tür
BALB/c
Bağışçının yaşı
6 hafta

10Ürün detayları

Bileşim tablosu