Skip to content
Bend.3
Tissue
สมอง, เปลือกสมอง
Disease
เอ็นโดทีลิโอมา
Synonyms
bEND.3, b.End3, bEnd.3, bEnd3, BEND3, brain-derived Endothelial cells.3

Documents

Bend.3

Cell line · Product number 305265

€430.00excl. tax and shipping
Made to order
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ไลน์ Bend.3 ได้มาจากเซลล์เยื่อบุผนังหลอดเลือดในสมองของหนู และถูกนำมาใช้กันอย่างแพร่หลายในงานวิจัยเกี่ยวกับระบบประสาทและหลอดเลือด เซลล์เหล่านี้ทำหน้าที่เป็นแบบจำลองสำหรับการศึกษาอุปสรรคเลือด-สมอง (BBB) ซึ่งเป็นโครงสร้างสำคัญที่ควบคุมการผ่านของสารต่าง ๆ จากกระแสเลือดเข้าสู่สมอง เซลล์ Bend.3 มีบทบาทสำคัญในการสำรวจกลไกระดับโมเลกุลและเซลล์ที่ควบคุมความสมบูรณ์ การซึมผ่าน และหน้าที่การขนส่งของ BBBนักวิจัยใช้เซลล์ Bend.3 เพื่อศึกษาพยาธิสรีรวิทยาของความผิดปกติทางระบบประสาทต่างๆ เช่น โรคหลอดเลือดสมอง โรคอัลไซเมอร์ และโรคปลอกประสาทเสื่อมแข็ง ซึ่งความผิดปกติของ BBB เป็นลักษณะเด่น

เซลล์ Bend.3 แสดงลักษณะของเซลล์เยื่อบุผนังหลอดเลือด รวมถึงการแสดงออกของโปรตีนที่เชื่อมต่อกันอย่างแน่นหนา เช่น occludin, claudins และ zonula occludens-1 (ZO-1) ซึ่งมีความสำคัญต่อการรักษาความสามารถในการเลือกซึมผ่านของ BBB นอกจากนี้ยังแสดงเครื่องหมายเช่น CD31 และ von Willebrand factor ซึ่งเป็นลักษณะเฉพาะของเซลล์เยื่อบุผนังหลอดเลือด เซลล์ Bend.3 ตอบสนองต่อสิ่งกระตุ้นการอักเสบและความเครียดออกซิเดชัน ทำให้เหมาะสมสำหรับการศึกษาเกี่ยวกับการรบกวน BBB และการอักเสบของระบบประสาทนอกจากนี้ สายเซลล์นี้ยังถูกใช้ในการประเมินประสิทธิภาพและความปลอดภัยของสารทางเภสัชวิทยาที่มีจุดประสงค์เพื่อข้าม BBB ซึ่งช่วยในการพัฒนาการรักษาความผิดปกติของระบบประสาทส่วนกลาง ความสามารถของเซลล์ Bend.3 ในการจำลองหน่วยประสาทหลอดเลือดย้ำถึงความสำคัญของพวกมันในการพัฒนาความเข้าใจของเราเกี่ยวกับชีววิทยาของเซลล์เยื่อบุผนังหลอดเลือดสมองและการพัฒนายารักษาโรคทางระบบประสาท

Tissue
สมอง, เปลือกสมอง
Disease
เอ็นโดทีลิโอมา
Synonyms
  • bEND.3
  • b.End3
  • bEnd.3
  • bEnd3
  • BEND3
  • brain-derived Endothelial cells.3

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Unspecified
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This murine endothelial cell line (bEnd.3) contains a polyomavirus middle T antigen encoded by the NTKmT retroviral vector, driving transformation and enhanced proliferation. The construct is stably present in brain microvascular endothelial cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
เยื่อบุผนังหลอดเลือด
Cell type
เซลล์บุผนังหลอดเลือด

04Identifiers

Citation
Bend.3 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305265)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_0170

05Expression and susceptibility

Antigen expression
ICAM-1 บวก, VCAM-1 บวก, MAdCAM-1 บวก
Viruses
ทรานส์ฟอร์แมนท์: มิวรีนโพลีโอมาไวรัส (สายพันธุ์ A2) (MPyV) มิดเดิล ที แอนติเจน (PyMT)

06Handling and culture

Culture medium
DMEM, w: 4.5 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 4 มิลลิโมลาร์ แอล-กลูตามีน, w: 3.7 กรัม/ลิตร NaHCO3, w: 1.0 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต (หมายเลขบทความ Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Breed / subspecies
BALB/c
Donor age
6 สัปดาห์

10Product details

Composition table