Přejít na obsah
Ohyb.3
Tkáň
Mozek, mozková kůra
Nemoc
Endoteliom
Synonyma
bEND.3, b.End3, bEnd.3, bEnd3, BEND3, brain-derived Endothelial cells.3

Dokumenty

Ohyb.3

Cell line · Číslo výrobku 305265

€430.00bez DPH a poštovného
Na zakázku
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie Bend.3 je odvozena z myších mozkových endoteliálních buněk a je široce využívána v neurovaskulárním výzkumu. Tyto buňky slouží jako model pro studium hematoencefalické bariéry (BBB), kritické struktury, která reguluje průchod látek z krevního řečiště do mozku. Buňky Bend.3 jsou užitečné při zkoumání molekulárních a buněčných mechanismů, které řídí integritu, propustnost a transportní funkce BBB. Vědci používají buňky Bend.3 ke zkoumání patofyziologie různých neurologických poruch, jako je mrtvice, Alzheimerova choroba a roztroušená skleróza, u nichž je dysfunkce BBB charakteristickým znakem.

Buňky Bend.3 vykazují vlastnosti endotelu, včetně exprese proteinů těsného spojení, jako jsou okludin, klaudiny a zonula occludens-1 (ZO-1), které jsou nezbytné pro udržení selektivní propustnosti BBB. Rovněž exprimují markery jako CD31 a von Willebrandův faktor, které jsou typické pro endotelové buňky. Buňky Bend.3 reagují na zánětlivé podněty a oxidační stres, takže jsou vhodné pro studie narušení BBB a neurozánětu. Kromě toho se tato buněčná linie používá k hodnocení účinnosti a bezpečnosti farmakologických látek určených k překonávání BBB, což napomáhá vývoji léčby poruch centrálního nervového systému. Užitečnost buněk Bend.3 při modelování neurovaskulární jednotky podtrhuje jejich význam pro lepší pochopení biologie mozkových endoteliálních buněk a vývoj neuroterapeutik.

Tkáň
Mozek, mozková kůra
Nemoc
Endoteliom
Synonyma
  • bEND.3
  • b.End3
  • bEnd.3
  • bEnd3
  • BEND3
  • brain-derived Endothelial cells.3

02Klasifikace

Organismus
Myš
Sex
Nespecifikováno
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Stav GMO
GMO-S1
Podrobnosti o statusu GMO
GMO-S1: This murine endothelial cell line (bEnd.3) contains a polyomavirus middle T antigen encoded by the NTKmT retroviral vector, driving transformation and enhanced proliferation. The construct is stably present in brain microvascular endothelial cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Endoteliální
Typ buňky
Endoteliální buňka

04Identifikátory

Citace
Bend.3 (katalogové číslo Cytion 305265)
Daňové identifikační číslo NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0170

05Exprese a náchylnost

Exprese antigenu
ICAM-1 +, VCAM-1 +, MAdCAM-1 +
Viry
Transformant: (kmen A2) (MPyV) střední T antigen (PyMT)

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutaminu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Plemeno / poddruh
BALB/c
Věk dárce
6 týdnů

10Podrobnosti o produktu

Tabulka složení