Bend.3

A linhagem celular Bend.3 é derivada de células endoteliais do cérebro de camundongo e é amplamente utilizada em pesquisas neurovasculares. Essas células servem como modelo para o estudo da barreira hematoencefálica (BHE), uma estrutura essencial que regula a passagem de substâncias da corrente sanguínea para o cérebro. As células Bend.3 são fundamentais para a exploração dos mecanismos moleculares e celulares que regem a integridade, a permeabilidade e as funções de transporte da BHE. Os pesquisadores utilizam as células Bend.3 para investigar a fisiopatologia de várias doenças neurológicas, como o AVC, a doença de Alzheimer e a esclerose múltipla, nas quais a disfunção da BHE é uma característica marcante.

As células Bend.3 apresentam características endoteliais, incluindo a expressão de proteínas de junções apertadas, como ocludina, claudinas e zonula occludens-1 (ZO-1), que são essenciais para manter a permeabilidade seletiva da BHE. Elas também expressam marcadores como CD31 e o fator von Willebrand, típicos das células endoteliais. As células Bend.3 respondem a estímulos inflamatórios e ao estresse oxidativo, tornando-as adequadas para estudos sobre a ruptura da BHE e a neuroinflamação. Além disso, essa linhagem celular é utilizada para avaliar a eficácia e a segurança de agentes farmacológicos destinados a atravessar a BHE, auxiliando no desenvolvimento de tratamentos para distúrbios do sistema nervoso central. A utilidade das células Bend.3 na modelagem da unidade neurovascular ressalta sua importância no avanço de nossa compreensão da biologia das células endoteliais cerebrais e no desenvolvimento de neuroterapêuticos.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.