Μετάβαση στο περιεχόμενο
Bend.3
Ιστός
Εγκέφαλος, εγκεφαλικός φλοιός
Ασθένεια
Ενδοθηλίωμα
Συνώνυμα
bEND.3, b.End3, bEnd.3, bEnd3, BEND3, brain-derived Endothelial cells.3

Έγγραφα

Bend.3

Cell line · Αριθμός προϊόντος 305265

€430.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής

Προσαρμογή / Προτάσεις

Κατασκευάζεται κατόπιν παραγγελίας
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Η κυτταρική σειρά Bend.3 προέρχεται από ενδοθηλιακά κύτταρα εγκεφάλου ποντικού και χρησιμοποιείται ευρέως στη νευροαγγειακή έρευνα. Τα κύτταρα αυτά χρησιμεύουν ως μοντέλο για τη μελέτη του αιματοεγκεφαλικού φραγμού (BBB), μιας κρίσιμης δομής που ρυθμίζει τη διέλευση ουσιών από την κυκλοφορία του αίματος στον εγκέφαλο. Τα κύτταρα Bend.3 διαδραματίζουν καθοριστικό ρόλο στη διερεύνηση των μοριακών και κυτταρικών μηχανισμών που διέπουν την ακεραιότητα, τη διαπερατότητα και τις λειτουργίες μεταφοράς του BBB. Οι ερευνητές χρησιμοποιούν κύτταρα Bend.3 για να διερευνήσουν την παθοφυσιολογία διαφόρων νευρολογικών διαταραχών, όπως το εγκεφαλικό επεισόδιο, η νόσος του Alzheimer και η σκλήρυνση κατά πλάκας, όπου η δυσλειτουργία του BBB αποτελεί χαρακτηριστικό γνώρισμα.

Τα κύτταρα Bend.3 παρουσιάζουν ενδοθηλιακά χαρακτηριστικά, συμπεριλαμβανομένης της έκφρασης πρωτεϊνών στενής σύνδεσης, όπως η αποκλουδίνη, οι κλοντίνες και η zonula occludens-1 (ZO-1), οι οποίες είναι απαραίτητες για τη διατήρηση της επιλεκτικής διαπερατότητας του ΒΒΒ. Εκφράζουν επίσης δείκτες όπως το CD31 και ο παράγοντας von Willebrand, χαρακτηριστικοί των ενδοθηλιακών κυττάρων. Τα κύτταρα Bend.3 ανταποκρίνονται σε φλεγμονώδη ερεθίσματα και οξειδωτικό στρες, γεγονός που τα καθιστά κατάλληλα για μελέτες σχετικά με τη διαταραχή του ΒΒΒ και τη νευροφλεγμονή. Επιπλέον, αυτή η κυτταρική σειρά χρησιμοποιείται για την αξιολόγηση της αποτελεσματικότητας και της ασφάλειας των φαρμακολογικών παραγόντων που προορίζονται να διασχίσουν τον ΒΒΒ, βοηθώντας στην ανάπτυξη θεραπειών για διαταραχές του κεντρικού νευρικού συστήματος. Η χρησιμότητα των κυττάρων Bend.3 στη μοντελοποίηση της νευροαγγειακής μονάδας υπογραμμίζει τη σημασία τους για την προώθηση της κατανόησης της βιολογίας των ενδοθηλιακών κυττάρων του εγκεφάλου και την ανάπτυξη νευροθεραπευτικών ουσιών.

Ιστός
Εγκέφαλος, εγκεφαλικός φλοιός
Ασθένεια
Ενδοθηλίωμα
Συνώνυμα
  • bEND.3
  • b.End3
  • bEnd.3
  • bEnd3
  • BEND3
  • brain-derived Endothelial cells.3

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Ποντίκι
Σεξ
Μη καθορισμένο
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Κατάσταση όσον αφορά τους ΓΤΟ
GMO-S1
Λεπτομέρειες σχετικά με την κατάσταση των ΓΤΟ
GMO-S1: This murine endothelial cell line (bEnd.3) contains a polyomavirus middle T antigen encoded by the NTKmT retroviral vector, driving transformation and enhanced proliferation. The construct is stably present in brain microvascular endothelial cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Ενδοθηλιακό
Τύπος κυττάρου
Ενδοθηλιακό κύτταρο

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
Bend.3 (αριθμός καταλόγου Cytion 305265)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
10090
Κελλοσαύρος
CVCL_0170

05Έκφραση και ευαισθησία

Έκφραση αντιγόνου
ICAM-1 +, VCAM-1 +, MAdCAM-1 +
Ιοί
Μετασχηματιστής: (στέλεχος Α2) (MPyV) μεσαίο Τ αντιγόνο (PyMT)

06Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
DMEM, w: 4,5 g/L γλυκόζη, w: 4 mM L-γλουταμίνη, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM πυρουβικό νάτριο (αριθμός άρθρου Cytion 820300a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

08Δωρητής

Φυλή / υποείδος
BALB/c
Ηλικία δωρητή
6 εβδομάδες

10Λεπτομέρειες προϊόντος

Πίνακας σύνθεσης