Pāriet uz saturu
Līkums.3
Audums
Smadzenes, smadzeņu garoza
Slimība
Endotelioma
Sinonīmi
bEND.3, b.End3, bEnd.3, bEnd3, BEND3, brain-derived Endothelial cells.3

Dokumenti

Līkums.3

Cell line · Preces numurs 305265

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Pēc pasūtījuma
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

Bend.3 šūnu līnija ir iegūta no peļu smadzeņu endotēlija šūnām un tiek plaši izmantota neirovaskulārajos pētījumos. Šīs šūnas kalpo kā modelis, lai pētītu hematoencefālisko barjeru (BBB), kas ir būtiska struktūra, kura regulē vielu nokļūšanu no asinsrites uz smadzenēm. Bend.3 šūnas ir noderīgas, pētot molekulāros un šūnu mehānismus, kas regulē BBB integritāti, caurlaidību un transporta funkcijas. Pētnieki izmanto Bend.3 šūnas, lai pētītu dažādu neiroloģisku traucējumu, piemēram, insulta, Alcheimera slimības un multiplās sklerozes, kuru raksturīga iezīme ir BBB disfunkcija, patofizioloģiju.

Bend.3 šūnām piemīt endotēlija īpašības, tostarp tādu blīvas savienošanās olbaltumvielu kā okludīns, klaudīns un zonula occludens-1 (ZO-1) ekspresija, kas ir būtiskas BBB selektīvās caurlaidības uzturēšanai. Tās arī ekspresē tādus endotēlija šūnām raksturīgus marķierus kā CD31 un fon Villebranda faktors. Bend.3 šūnas reaģē uz iekaisuma stimuliem un oksidatīvo stresu, tāpēc tās ir piemērotas pētījumiem par BBB traucējumiem un neirona iekaisumu. Turklāt šo šūnu līniju izmanto, lai novērtētu to farmakoloģisko līdzekļu efektivitāti un drošību, kas paredzēti, lai šķērsotu BBB, palīdzot izstrādāt ārstēšanas līdzekļus centrālās nervu sistēmas traucējumu ārstēšanai. Bend.3 šūnu lietderība neirovaskulārās vienības modelēšanā uzsver to nozīmi, lai uzlabotu mūsu izpratni par smadzeņu endotēlija šūnu bioloģiju un neiroterapiju izstrādi.

Audums
Smadzenes, smadzeņu garoza
Slimība
Endotelioma
Sinonīmi
  • bEND.3
  • b.End3
  • bEnd.3
  • bEnd3
  • BEND3
  • brain-derived Endothelial cells.3

02Klasifikācija

Organisms
Pele
Sekss
Nav norādīts
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
ĢMO statuss
GMO-S1
Sīkāka informācija par ĢMO statusu
GMO-S1: This murine endothelial cell line (bEnd.3) contains a polyomavirus middle T antigen encoded by the NTKmT retroviral vector, driving transformation and enhanced proliferation. The construct is stably present in brain microvascular endothelial cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Endotēlija
Šūnu tips
Endotēlija šūna

04Identifikatori

Atsauce
Bend.3 (Cytion kataloga numurs 305265)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
10090
Cellosaurus
CVCL_0170

05Pazīmes un uzņēmība

Antigēna ekspresija
ICAM-1 +, VCAM-1 +, MAdCAM-1 +
Vīrusi
Transformants: (MPyV) vidējais T antigēns (PyMT): Murine polyomavirus (celms A2) (MPyV)

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Šķirne / pasuga
BALB/c
Donora vecums
6 nedēļas

10Informācija par produktu

Sastāva tabula