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Bend.3
Tissue
Cerebro, corteza cerebral
Disease
Endotelioma
Synonyms
bEND.3, b.End3, bEnd.3, bEnd3, BEND3, brain-derived Endothelial cells.3

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Bend.3

Cell line · Product number 305265

US$395.00excl. tax and shipping
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Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

La línea celular Bend.3 se deriva de células endoteliales del cerebro de ratón y se utiliza ampliamente en la investigación neurovascular. Estas células sirven como modelo para estudiar la barrera hematoencefálica (BHE), una estructura fundamental que regula el paso de sustancias del torrente sanguíneo al cerebro. Las células Bend.3 son fundamentales para explorar los mecanismos moleculares y celulares que rigen la integridad, la permeabilidad y las funciones de transporte de la BHE. Los investigadores utilizan las células Bend.3 para investigar la fisiopatología de diversos trastornos neurológicos, como el accidente cerebrovascular, la enfermedad de Alzheimer y la esclerosis múltiple, en los que la disfunción de la BHE es un rasgo característico.

Las células Bend.3 presentan características endoteliales, incluida la expresión de proteínas de uniones estrechas como la ocludina, las claudinas y la zonula occludens-1 (ZO-1), que son esenciales para mantener la permeabilidad selectiva de la BHE. También expresan marcadores como el CD31 y el factor von Willebrand, típicos de las células endoteliales. Las células Bend.3 responden a estímulos inflamatorios y al estrés oxidativo, lo que las hace adecuadas para estudios sobre la alteración de la BHE y la neuroinflamación. Además, esta línea celular se utiliza para evaluar la eficacia y la seguridad de agentes farmacológicos destinados a atravesar la BHE, lo que contribuye al desarrollo de tratamientos para trastornos del sistema nervioso central. La utilidad de las células Bend.3 en la modelación de la unidad neurovascular subraya su importancia para avanzar en nuestra comprensión de la biología de las células endoteliales cerebrales y el desarrollo de neuroterapéuticos.

Tissue
Cerebro, corteza cerebral
Disease
Endotelioma
Synonyms
  • bEND.3
  • b.End3
  • bEnd.3
  • bEnd3
  • BEND3
  • brain-derived Endothelial cells.3

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Unspecified
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This murine endothelial cell line (bEnd.3) contains a polyomavirus middle T antigen encoded by the NTKmT retroviral vector, driving transformation and enhanced proliferation. The construct is stably present in brain microvascular endothelial cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Endotelial
Cell type
Célula endotelial

04Identifiers

Citation
Bend.3 (número de catálogo de Cytion 305265)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_0170

05Expression and susceptibility

Antigen expression
ICAM-1+, VCAM-1+, MAdCAM-1+
Viruses
Transformante: Antígeno T medio del poliomavirus murino (cepa A2) (MPyV) (PyMT)

06Handling and culture

Culture medium
DMEM, p/v: 4,5 g/L de glucosa, p/v: 4 mM de L-glutamina, p/v: 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v: 1,0 mM de piruvato de sodio (número de artículo de Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

Supplements
Añade al medio un 10 % de FBS
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Retira el medio usado de las células adheridas y lávalas con PBS sin calcio ni magnesio. Para los frascos T25, usa de 3 a 5 ml de PBS, y para los frascos T75, usa de 5 a 10 ml. Luego, cubra las células por completo con Accutase, utilizando de 1 a 2 ml para los frascos T25 y 2,5 ml para los frascos T75. Deje que las células se incuben a temperatura ambiente durante 8 a 10 minutos para desprenderse. Después de la incubación, mezcla suavemente las células con 10 ml de medio para resuspendarlas; luego, centrifuga a 300xg durante 3 minutos. Deseche el sobrenadante, resuspenda las células en medio fresco y transfiéralas a frascos nuevos que ya contengan medio fresco.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Freeze medium
Como medio de criopreservación, utilizamos un medio de crecimiento completo (que incluye FBS) + 10 % de DMSO para garantizar una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo de Cytion 800100), que incluye osmoprotectores y estabilizadores metabólicos optimizados para mejorar la recuperación y reducir el estrés inducido por la criopreservación.
Storage conditions

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Shipping conditions

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

08Donor

Breed / subspecies
BALB/c
Donor age
6 semanas

10Product details

Composition table