Siirry sisältöön
Taivuta.3
Kudos
Aivot, aivokuori
Sairaus
Endoteliooma
Synonyymit
bEND.3, b.End3, bEnd.3, bEnd3, BEND3, brain-derived Endothelial cells.3

Asiakirjat

Taivuta.3

Cell line · Tuotenumero 305265

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Valmistetaan tilauksesta
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

Bend.3-solulinja on peräisin hiiren aivojen endoteelisoluista, ja sitä käytetään laajalti neurovaskulaaritutkimuksessa. Nämä solut toimivat mallina veri-aivoesteen (BBB) tutkimisessa, joka on kriittinen rakenne, joka säätelee aineiden kulkua verenkierrosta aivoihin. Bend.3-solut ovat tärkeitä tutkittaessa molekyyli- ja solumekanismeja, jotka säätelevät BBB:n eheyttä, läpäisevyyttä ja kuljetustoimintoja. Tutkijat käyttävät Bend.3-soluja tutkiessaan erilaisten neurologisten sairauksien, kuten aivohalvauksen, Alzheimerin taudin ja multippeliskleroosin, patofysiologiaa.

Bend.3-soluilla on endoteelin ominaisuuksia, kuten tiukkojen liitosproteiinien, kuten okkludiinin, klaudiinien ja zonula occludens-1:n (ZO-1) ilmentyminen, jotka ovat välttämättömiä BBB:n selektiivisen läpäisevyyden ylläpitämisessä. Ne ilmentävät myös endoteelisoluille tyypillisiä merkkiaineita, kuten CD31:tä ja von Willebrandin tekijää. Bend.3-solut reagoivat tulehdusärsykkeisiin ja oksidatiiviseen stressiin, joten ne soveltuvat BBB:n häiriöiden ja neuroinflammaation tutkimiseen. Lisäksi tätä solulinjaa käytetään arvioitaessa sellaisten farmakologisten aineiden tehoa ja turvallisuutta, jotka on tarkoitettu läpäisemään BBB:tä, mikä auttaa keskushermoston sairauksien hoitojen kehittämisessä. Bend.3-solujen hyödyllisyys neurovaskulaarisen yksikön mallintamisessa korostaa niiden merkitystä aivojen endoteelisolujen biologian ymmärtämisen ja neuroterapeuttisten lääkkeiden kehittämisen kannalta.

Kudos
Aivot, aivokuori
Sairaus
Endoteliooma
Synonyymit
  • bEND.3
  • b.End3
  • bEnd.3
  • bEnd3
  • BEND3
  • brain-derived Endothelial cells.3

02Luokittelu

Organismi
Hiiri
Sukupuoli
Määrittelemätön
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
GMO-status
GMO-S1
GMO-statuksen tiedot
GMO-S1: This murine endothelial cell line (bEnd.3) contains a polyomavirus middle T antigen encoded by the NTKmT retroviral vector, driving transformation and enhanced proliferation. The construct is stably present in brain microvascular endothelial cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Endoteeli
Solutyyppi
Endoteelisolu

04Tunnisteet

Lähdeviite
Bend.3 (Cytionin luettelonumero 305265)
NCBI-verotunnus
10090
Cellosaurus
CVCL_0170

05Ilmentyminen ja alttius

Antigeenin ilmentyminen
ICAM-1 +, VCAM-1 +, MAdCAM-1 +, MAdCAM-1 +
Virukset
Muuntaja: Murine polyomavirus (kanta A2) (MPyV) keskimmäinen T-antigeeni (PyMT)

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia (Cytionin artikkelinumero 820300a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Rotua / alalajia
BALB/c
Luovuttajan ikä
6 viikkoa

10Tuotetiedot

Koostumustaulukko