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Curva 3
Tecido
Cérebro, córtex cerebral
Doença
Endotelioma
Sinónimos
bEND.3, b.End3, bEnd.3, bEnd3, BEND3, brain-derived Endothelial cells.3

Documentos

Curva 3

Cell line · Número do produto 305265

€430.00sem impostos nem portes de envio
Feito por encomenda
Lote
Recomendado (lote mais recente)
  • CoA
1

01Informações gerais

Descrição

A linha celular Bend.3 é derivada de células endoteliais do cérebro do rato e é amplamente utilizada na investigação neurovascular. Estas células servem de modelo para o estudo da barreira hemato-encefálica (BBB), uma estrutura crítica que regula a passagem de substâncias da corrente sanguínea para o cérebro. As células Bend.3 são fundamentais para explorar os mecanismos moleculares e celulares que regem a integridade, a permeabilidade e as funções de transporte da BHE. Os investigadores utilizam as células Bend.3 para investigar a fisiopatologia de várias doenças neurológicas, como o acidente vascular cerebral, a doença de Alzheimer e a esclerose múltipla, em que a disfunção da BHE é uma caraterística distintiva.

As células Bend.3 apresentam caraterísticas endoteliais, incluindo a expressão de proteínas de junção apertada, como a ocludina, as claudinas e a zonula occludens-1 (ZO-1), que são essenciais para manter a permeabilidade selectiva da BHE. Também expressam marcadores como o CD31 e o fator de von Willebrand, típicos das células endoteliais. As células Bend.3 respondem a estímulos inflamatórios e ao stress oxidativo, o que as torna adequadas para estudos sobre a rutura da BHE e a neuroinflamação. Além disso, esta linha celular é utilizada para avaliar a eficácia e a segurança de agentes farmacológicos destinados a atravessar a BHE, ajudando no desenvolvimento de tratamentos para doenças do sistema nervoso central. A utilidade das células Bend.3 na modelação da unidade neurovascular sublinha a sua importância para o avanço da nossa compreensão da biologia das células endoteliais cerebrais e para o desenvolvimento de neuroterapêuticas.

Tecido
Cérebro, córtex cerebral
Doença
Endotelioma
Sinónimos
  • bEND.3
  • b.End3
  • bEnd.3
  • bEnd3
  • BEND3
  • brain-derived Endothelial cells.3

02Classificação

Organismo
Rato
Sexo
Não especificado
Propriedades de crescimento
Aderente
Estatuto em matéria de OGM
GMO-S1
Detalhes sobre o estatuto dos OGM
GMO-S1: This murine endothelial cell line (bEnd.3) contains a polyomavirus middle T antigen encoded by the NTKmT retroviral vector, driving transformation and enhanced proliferation. The construct is stably present in brain microvascular endothelial cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Endotelial
Tipo de célula
Célula endotelial

04Identificadores

Referência
Bend.3 (número de catálogo Cytion 305265)
Número de identificação fiscal do NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0170

05Expressão e suscetibilidade

Expressão do antígeno
ICAM-1 +, VCAM-1 +, MAdCAM-1 +
Vírus
Transformante: Antigénio T médio do poliomavírus murino (estirpe A2) (MPyV) (PyMT)

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
DMEM, com: 4,5 g/L de glucose, com: 4 mM de L-Glutamina, com: 3,7 g/L de NaHCO3, com: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo Cytion 820300a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Raça / subespécie
BALB/c
Idade do dador
6 semanas

10Detalhes do produto

Tabela de composição