Mine otse sisu juurde
Bend.3
Kude
Aju, ajukoor, ajukoor
Haigus
Endotelioom
Sünonüümid
bEND.3, b.End3, bEnd.3, bEnd3, BEND3, brain-derived Endothelial cells.3

Dokumendid

Bend.3

Cell line · Toote number 305265

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Tellimusel valmistatud
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

Bend.3 rakuliin on saadud hiire aju endoteelirakkudest ja seda kasutatakse laialdaselt neurovaskulaarsetes uuringutes. Need rakud on mudeliks vere-aju barjääri (BBB) uurimiseks, mis on kriitiline struktuur, mis reguleerib ainete läbipääsu vereringest ajju. Bend.3 rakud on olulised BBB terviklikkust, läbilaskvust ja transpordifunktsioone reguleerivate molekulaar- ja rakumehhanismide uurimisel. Teadlased kasutavad Bend.3 rakke erinevate neuroloogiliste haiguste, näiteks insuldi, Alzheimeri tõve ja hulgiskleroosi patofüsioloogia uurimiseks, kus BBB düsfunktsioon on iseloomulik.

Bend.3 rakkudel on endoteeliomadused, sealhulgas tihedate ühenduste valkude, nagu okludiin, klaudiinid ja zonula occludens-1 (ZO-1), ekspressioon, mis on olulised BBB selektiivse läbilaskvuse säilitamiseks. Nad ekspresseerivad ka selliseid markereid nagu CD31 ja von Willebrandi faktor, mis on endoteelirakkudele iseloomulikud. Bend.3 rakud reageerivad põletikulistele stiimulitele ja oksüdatiivsele stressile, mistõttu sobivad nad BBB häirete ja neuroinflammatsiooni uuringuteks. Lisaks kasutatakse seda rakuliini BBB läbimiseks mõeldud farmakoloogiliste ainete tõhususe ja ohutuse hindamiseks, mis aitab kaasa kesknärvisüsteemi haiguste ravi väljatöötamisele. Bend.3 rakkude kasulikkus neurovaskulaarse üksuse modelleerimisel rõhutab nende tähtsust aju endoteelirakkude bioloogia mõistmise ja neuroterapeutikumide väljatöötamise edendamisel.

Kude
Aju, ajukoor, ajukoor
Haigus
Endotelioom
Sünonüümid
  • bEND.3
  • b.End3
  • bEnd.3
  • bEnd3
  • BEND3
  • brain-derived Endothelial cells.3

02Klassifikatsioon

Organism
Hiir
Sugu
Määratlemata
Kasvuvõime
Järgija
GMO-staatus
GMO-S1
GMO-staatuse üksikasjad
GMO-S1: This murine endothelial cell line (bEnd.3) contains a polyomavirus middle T antigen encoded by the NTKmT retroviral vector, driving transformation and enhanced proliferation. The construct is stably present in brain microvascular endothelial cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Endoteeli
Rakutüüp
Endoteeli rakk

04Tunnused

Viide
Bend.3 (Cytioni katalooginumber 305265)
NCBI maksukood
10090
Cellosaurus
CVCL_0170

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Antigeeni ekspressioon
ICAM-1 +, VCAM-1 +, MAdCAM-1 +, MAdCAM-1 +
Viirused
Transformant: Murine polyomavirus (tüvi A2) (MPyV) keskmine T antigeen (PyMT)

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Tõug / alamliik
BALB/c
Doonori vanus
6 nädalat

10Toote üksikasjad

Koostis tabel