Pereiti prie turinio
Lenkimas.3
Audinys
Smegenys, smegenų žievė
Liga
Endotelioma
Sinonimai
bEND.3, b.End3, bEnd.3, bEnd3, BEND3, brain-derived Endothelial cells.3

Dokumentai

Lenkimas.3

Cell line · Prekės numeris 305265

€430.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų
Pagaminta pagal užsakymą
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

Bend.3 ląstelių linija yra kilusi iš pelių smegenų endotelio ląstelių ir plačiai naudojama atliekant neurovaskulinius tyrimus. Šios ląstelės naudojamos kaip modelis tiriant kraujo-smegenų barjerą (BBB) - svarbią struktūrą, reguliuojančią medžiagų patekimą iš kraujo į smegenis. Bend.3 ląstelės padeda tirti molekulinius ir ląstelinius mechanizmus, reguliuojančius BBB vientisumą, pralaidumą ir transportavimo funkcijas. Mokslininkai Bend.3 ląsteles naudoja įvairių neurologinių sutrikimų, tokių kaip insultas, Alzheimerio liga ir išsėtinė sklerozė, kuriems būdinga BBB disfunkcija, patofiziologijai tirti.

Bend.3 ląstelės pasižymi endotelio savybėmis, įskaitant sandarios jungties baltymų, tokių kaip okludinas, klaudinas ir zonula occludens-1 (ZO-1), kurie yra būtini selektyviam BBB pralaidumui palaikyti, raišką. Jos taip pat išreiškia endotelio ląstelėms būdingus žymenis, tokius kaip CD31 ir von Willebrando faktorius. Bend.3 ląstelės reaguoja į uždegiminius dirgiklius ir oksidacinį stresą, todėl jos tinka BBB sutrikimų ir neurouždegimo tyrimams. Be to, ši ląstelių linija naudojama vertinant farmakologinių preparatų, kurie gali prasiskverbti per BBB, veiksmingumą ir saugumą, padedant kurti centrinės nervų sistemos sutrikimų gydymo būdus. Bend.3 ląstelių naudingumas modeliuojant neurovaskulinį vienetą pabrėžia jų svarbą gerinant smegenų endotelio ląstelių biologijos supratimą ir kuriant neuroterapiją.

Audinys
Smegenys, smegenų žievė
Liga
Endotelioma
Sinonimai
  • bEND.3
  • b.End3
  • bEnd.3
  • bEnd3
  • BEND3
  • brain-derived Endothelial cells.3

02Klasifikacija

Organizmas
Pele
Seksas
Nenurodyta
Augimo savybės
Prisijungęs
GMO statusas
GMO-S1
Išsami informacija apie GMO statusą
GMO-S1: This murine endothelial cell line (bEnd.3) contains a polyomavirus middle T antigen encoded by the NTKmT retroviral vector, driving transformation and enhanced proliferation. The construct is stably present in brain microvascular endothelial cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Endotelis
Ląstelių tipas
Endotelio ląstelė

04Identifikatoriai

Nuoroda
Bend.3 (Cytion katalogo numeris 305265)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
10090
Cellosaurus
CVCL_0170

05Išraiška ir jautrumas

Antigeno ekspresija
ICAM-1 +, VCAM-1 +, MAdCAM-1 +
Virusai
Transformantas: (MPyV) vidurinysis T antigenas (PyMT)

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
DMEM, š: 4,5 g/l gliukozės, š: 4 mM L-glutamino, š: 3,7 g/l NaHCO3, š: 1,0 mM natrio piruvato (Cytion gaminio numeris 820300a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Veislė / porūšis
BALB/c
Donoro amžius
6 savaitės

10Produkto aprašymas

Sudėties lentelė