Tartalomra ugrás
Bend.3
Szövet
Agy, agykéreg
Betegség
Endothelioma
Szinonimák
bEND.3, b.End3, bEnd.3, bEnd3, BEND3, brain-derived Endothelial cells.3

Dokumentumok

Bend.3

Cell line · Termékszám 305265

€430.00adó és szállítási költség nélkül
Rendelésre készül
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

A Bend.3 sejtvonal egér agyi endotélsejtekből származik, és széles körben használják a neurovaszkuláris kutatásokban. Ezek a sejtek modellként szolgálnak a vér-agy gát (BBB) tanulmányozásához, amely kritikus struktúra szabályozza az anyagok átjutását a véráramból az agyba. A Bend.3 sejtek fontos szerepet játszanak a BBB integritását, permeabilitását és a transzportfunkciókat szabályozó molekuláris és sejtes mechanizmusok feltárásában. A kutatók a Bend.3 sejteket különböző neurológiai betegségek, például a stroke, az Alzheimer-kór és a szklerózis multiplex patofiziológiájának vizsgálatára használják, ahol a BBB diszfunkciója jellemző.

A Bend.3 sejtek endothelialis jellegzetességeket mutatnak, beleértve az olyan szoros kötésfehérjék, mint az occludin, a claudinok és a zonula occludens-1 (ZO-1) expresszióját, amelyek elengedhetetlenek a BBB szelektív áteresztőképességének fenntartásához. Olyan markereket is kifejeznek, mint a CD31 és a von Willebrand-faktor, amelyek az endotélsejtekre jellemzőek. A Bend.3 sejtek reagálnak a gyulladásos ingerekre és az oxidatív stresszre, így alkalmasak a BBB zavarainak és a neuroinflammációnak a vizsgálatára. Ezenkívül ezt a sejtvonalat a BBB-n áthatolni szándékozó farmakológiai szerek hatékonyságának és biztonságosságának értékelésére használják, segítve ezzel a központi idegrendszeri rendellenességek kezelésének fejlesztését. A Bend.3 sejtek hasznossága a neurovaszkuláris egység modellezésében aláhúzza fontosságukat az agyi endotélsejtek biológiájának megértésében és a neuroterápiás szerek kifejlesztésében.

Szövet
Agy, agykéreg
Betegség
Endothelioma
Szinonimák
  • bEND.3
  • b.End3
  • bEnd.3
  • bEnd3
  • BEND3
  • brain-derived Endothelial cells.3

02Osztályozás

Organizmus
Egér
Szex
Nem meghatározott
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
GMO-státusz
GMO-S1
A GMO-státuszra vonatkozó részletek
GMO-S1: This murine endothelial cell line (bEnd.3) contains a polyomavirus middle T antigen encoded by the NTKmT retroviral vector, driving transformation and enhanced proliferation. The construct is stably present in brain microvascular endothelial cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Endothelialis
Sejttípus
Endothelsejt

04Azonosítók

Hivatkozás
Bend.3 (Cytion katalógusszám: 305265)
NCBI adóazonosító szám
10090
Cellosaurus
CVCL_0170

05Kifejeződés és fogékonyság

Antigén-expresszió
ICAM-1 +, VCAM-1 +, MAdCAM-1 +, MAdCAM-1 +
Vírusok
Transzformáns: (A2 törzs) (MPyV) középső T antigén (PyMT)

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
DMEM, w: 4,5 g/L glükóz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM nátrium-piruvát (Cytion cikkszám 820300a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Faj / alfaj
BALB/c
Az adományozó életkora
6 hét

10Termékadatok

Összetételi táblázat