Ga naar de inhoud
Bend.3
Weefsel
Hersenen, hersenschors
Ziekte
Endotheliomen
Synoniemen
bEND.3, b.End3, bEnd.3, bEnd3, BEND3, brain-derived Endothelial cells.3

Documenten

Bend.3

Cell line · Productnummer 305265

€430.00excl. btw en verzendkosten
Op bestelling gemaakt
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De Bend.3 cellijn is afgeleid van muizenhersenendotheelcellen en wordt veel gebruikt in neurovasculair onderzoek. Deze cellen dienen als model voor het bestuderen van de bloed-hersenbarrière (BBB), een cruciale structuur die de doorgang van stoffen van de bloedbaan naar de hersenen regelt. Bend.3 cellen zijn essentieel bij het onderzoeken van de moleculaire en cellulaire mechanismen die de integriteit, doorlaatbaarheid en transportfuncties van de BBB bepalen. Onderzoekers gebruiken Bend.3 cellen om de pathofysiologie van verschillende neurologische aandoeningen te onderzoeken, zoals beroerte, de ziekte van Alzheimer en multiple sclerose, waarbij disfunctie van de BBB een kenmerk is.

Bend.3 cellen vertonen endotheliale kenmerken, waaronder de expressie van tight junction eiwitten zoals occludine, claudine en zonula occludens-1 (ZO-1), die essentieel zijn voor het in stand houden van de selectieve doorlaatbaarheid van de BBB. Ze brengen ook markers als CD31 en von Willebrand factor tot expressie, die typisch zijn voor endotheelcellen. Bend.3 cellen reageren op ontstekingsstimuli en oxidatieve stress, waardoor ze geschikt zijn voor studies naar de verstoring van de BBB en neuro-inflammatie. Daarnaast wordt deze cellijn gebruikt om de werkzaamheid en veiligheid te beoordelen van farmacologische middelen die bedoeld zijn om de BBB te passeren, wat helpt bij de ontwikkeling van behandelingen voor aandoeningen van het centrale zenuwstelsel. Het nut van Bend.3 cellen bij het modelleren van de neurovasculaire eenheid onderstreept hun belang voor het bevorderen van ons begrip van de endotheelcelbiologie van de hersenen en de ontwikkeling van neurotherapeutica.

Weefsel
Hersenen, hersenschors
Ziekte
Endotheliomen
Synoniemen
  • bEND.3
  • b.End3
  • bEnd.3
  • bEnd3
  • BEND3
  • brain-derived Endothelial cells.3

02Classificatie

Organisme
Muis
Seks
Niet gespecificeerd
Groei-eigenschappen
Aanhanger
GGO-status
GMO-S1
Details over de GGO-status
GMO-S1: This murine endothelial cell line (bEnd.3) contains a polyomavirus middle T antigen encoded by the NTKmT retroviral vector, driving transformation and enhanced proliferation. The construct is stably present in brain microvascular endothelial cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Endotheel
Celtype
Endotheelcel

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
Bend.3 (Cytion catalogusnummer 305265)
NCBI-belastingnummer
10090
Cellosaurus
CVCL_0170

05Expressie en vatbaarheid

Antigeenexpressie
ICAM-1 +, VCAM-1 +, MAdCAM-1 +
Virussen
Transformant: Murien polyomavirus (stam A2) (MPyV) middelste T-antigeen (PyMT)

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvaat (Cytion artikelnummer 820300a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Soort / ondersoort
BALB/c
Leeftijd van de donor
6 weken

10Productgegevens

Overzichtstabel