Preskoči na vsebino
Zgib.3
Tkivo
Možgani, možganska skorja
Bolezen
Endoteliom
Sinonimi
bEND.3, b.End3, bEnd.3, bEnd3, BEND3, brain-derived Endothelial cells.3

Dokumenti

Zgib.3

Cell line · Številka izdelka 305265

€430.00brez davka in stroškov poštnine
Po naročilu
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija Bend.3 izhaja iz endotelijskih celic mišjih možganov in se pogosto uporablja pri nevrovaskularnih raziskavah. Te celice služijo kot model za preučevanje krvno-možganske pregrade (BBB), kritične strukture, ki uravnava prehajanje snovi iz krvnega obtoka v možgane. Celice Bend.3 so pomembne za raziskovanje molekularnih in celičnih mehanizmov, ki uravnavajo celovitost, prepustnost in transportne funkcije BBB. Raziskovalci uporabljajo celice Bend.3 za raziskovanje patofiziologije različnih nevroloških motenj, kot so kap, Alzheimerjeva bolezen in multipla skleroza, pri katerih je značilna disfunkcija BBB.

Celice Bend.3 imajo značilnosti endotelija, vključno z izražanjem beljakovin tesnega spoja, kot so okludin, klavdini in zonula occludens-1 (ZO-1), ki so bistvene za ohranjanje selektivne prepustnosti BBB. Izražajo tudi označevalce, kot sta CD31 in von Willebrandov faktor, ki so značilni za endotelijske celice. Celice Bend.3 se odzivajo na vnetne dražljaje in oksidativni stres, zato so primerne za študije o motnjah BBB in nevrovnetjih. Poleg tega se ta celična linija uporablja za ocenjevanje učinkovitosti in varnosti farmakoloških sredstev, namenjenih prehajanju skozi BBB, kar pomaga pri razvoju zdravljenja motenj osrednjega živčnega sistema. Uporabnost celic Bend.3 pri modeliranju nevrovaskularne enote poudarja njihov pomen za izboljšanje razumevanja biologije možganskih endotelijskih celic in razvoj nevroterapevtikov.

Tkivo
Možgani, možganska skorja
Bolezen
Endoteliom
Sinonimi
  • bEND.3
  • b.End3
  • bEnd.3
  • bEnd3
  • BEND3
  • brain-derived Endothelial cells.3

02Razvrstitev

Organizem
Miška
Seks
Ni navedeno
Lastnosti rasti
Pripadnik
Status GSO
GMO-S1
Podrobnosti o statusu GSO
GMO-S1: This murine endothelial cell line (bEnd.3) contains a polyomavirus middle T antigen encoded by the NTKmT retroviral vector, driving transformation and enhanced proliferation. The construct is stably present in brain microvascular endothelial cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Endotelijski
Vrsta celice
Endotelijska celica

04Identifikatorji

Navajanje vira
Bend.3 (kataloška številka Cytion 305265)
Davčna identifikacijska številka NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0170

05Izražanje in dovzetnost

Ekspresija antigena
ICAM-1 +, VCAM-1 +, MAdCAM-1 +
Virusi
Transformant: (MPyV) srednji T antigen (PyMT)

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
DMEM, w: 4,5 g/L glukoze, w: 4 mM L-glutamina, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natrijevega piruvata (številka izdelka Cytion 820300a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Pasma / podvrsta
BALB/c
Starost darovalca
6 tednov

10Podrobnosti o izdelku

Tabela sestave